Microtecnicas Botanicas

CÁTEDRA FARMACOBOTÁNICA TRABAJO PRÁCTICO Nº 8
Alumno/a Fecha:

TEMA: MICROTECNICAS BOTANICAS
Objetivos: Identificar reactivos y técnicas histológicas utilizados para observar estructuras anatómicas vegetales. Aplicar técnicas histológicas para obtener preparados vegetales temporarios y definitivos. Conocer reactivos y técnicas para realizar pruebas histoquímicas. Actividades: Preparación defijadores, medios de montaje colorantes. Cortes a mano libre, coloración directa y montaje. Obtención de epidermis, diafanización y maceración. Materiales a proveer por el laboratorio: Agua destilada, ácido acético glacial, formol, alcohol etílico 96º, gelatina, glicerina, cristales de fenol, safranina, alcohol etílico 80º, hipoclorito de Na, alcohol etílico 70º. vasos de precipitado, pipetas, balanzade precisión. Materiales a proveer por los alumnos: Tallos de apio (Apium graveolens), hinojo (Foeniculum vulgare), caléndula (Calendula officinalis) o cala (Zantedeschia aethiopica). Hoja de gomero (Ficus elastica), laurel (Laurus nobilis), ligustro (Ligustrum lucidum) o eucalipto (Eucalyptus sp.).

Actividad Nº 1 Preparación de fijadores, colorantes, serie de alcoholes. a) FIJADOR FAA (FormolAceto Alcohólico) - Alcohol etílico 96º.......................50 ml. - Agua destilada...........................35 ml. - Formol.......................................10 ml. - Acido acético glacial.................. 5 ml. b) SAFRANINA Se expende en polvo; fraccionamiento mínimo 25 gr. Se emplea en soluciones alcohólicas, saturadas o no, en alcohol etílico 80º. También en soluciones hidro alcóholicas:se prepara safranina al 1% en alcohol etílico 96º y se diluye la cantidad d preparada 4 veces en agua destilada. c) VERDE RAPIDO Llamado comúnmente "fast-green". Se usa en soluciones saturadas de alcohol etílico absoluto. Fraccionamiento mínimo 10 gr. d) SERIE DE ALCOHOLES Tabla de dilución según Gay Lussac (Langeron, 1949). A 100 ml. de alcohol 96º se debe agregar la siguiente cantidad de aguadestilada:

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Alcohol a obtener

cc de agua a agregar

30º...........................................................227,70 40º...........................................................147,22 50º.............................................................98,15 60º.............................................................64,9270º.............................................................40,85 80º.............................................................22,45 90º...............................................................7,73 Actividad Nº2 Obtención de preparado fresco Materiales Material verde de la pared de un acuario (pecera) Hoja de Elodea (planta acuática) Procedimiento • Coloque una porción del material sobreun portaobjetos • Agregue una o dos gotas de agua • Coloque el cubreobjetos • Observe al microscopio con el menor aumento y luego con el mayor • Esquematice Actividad Nº3 Corte a mano libre, coloración directa y montaje. a) Corte a mano libre: Tomar un trozo de médula de hinojo o raíz de zanahoria, de una longitud aproximada de 2 cm. Cortar en sentido longitudinal por el centro, dejando la baseentera y colocar el material a cortar entre ambos semicilindros. Sostener con una mano y con la otra deslizar perpendicularmente una hoja de afeitar nueva, cortando como si todo fuera una unidad. Es conveniente mantener húmeda la superficie a cortar. Recoger los cortes en vidrio de reloj con agua destilada. Seleccionar los cortes más delgados bajo lupa. b) Coloración directa con Safranina 1-Clarificar los cortes con hipoclorito de Na al 50% hasta que se observen blancos o casi transparentes (según el material). 2- Lavar varias veces con agua destilada (5-6 veces). 3- Pasar por alcohol 70%. 4- Colorear con safranina diluida al 1% durante 2-5 minutos. 5- Lavar con agua destilada.

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Actividad Nº 4 DIAFANIZADO Técnica de...