mioestatina

ÍNDICE

1. INTRODUCCIÓN

1

1.1. La superfamilia del TGF-β

3

1.2. La miostatina

7

1.3. Biosíntesis de la miostatina y regulación de la miostatina latente

12

1.4. Mecanismo de acción de la miostatina

14

1.5. Contextualización del desarrollo muscular como respuesta a la miostatina
17
1.6. Hematopoyesis

19

1.6.1. Papel de los miembros de la superfamiliadel TGF-β en la
hematopoyesis

25

2. OBJETIVOS

29

3. MATERIALES Y MÉTODOS

33

3.1. Animales

35

3.1.1. Recuentos hematológicos

36

3.1.2. Ensayos de maduración de granulocitos

37

3.1.3. Ensayos de células de ratón formadoras de colonias

37

3.2. Líneas celulares

38

3.2.1. Proliferación

38

3.2.2. Apoptosis

39

3.2.3. Diferenciación

393.3. RT-PCR

40

3.4. Western blot

42

3.5. Inmunocitoquímica

43

4. RESULTADOS

45

4.1. La miostatina y su sistema de receptores se expresan en células hemáticas
47
4.1.1. Expresión de MSTN en células hemáticas

47

4.1.2. Expresión de MSTN en líneas celulares hematopoyéticas

48

4.2. Acciones de la miostatina en células hematopoyéticas

52

4.2.1. HL60

524.2.2. JURKAT

58

4.2.3. K562

59

4.3. Acciones de la miostatina sobre la hematopoyesis in vivo

61

4.3.1. Papel de la MSTN en la granulopoyesis

62

4.3.2. Papel de la MSTN en la eritropoyesis

66

5. DISCUSIÓN

69

6. CONCLUSIONES

79

7. BIBLIOGRAFÍA

83

Lista de Abreviaturas
Act: Activin
Act-R: Activin Receptor
ALK: Activin Recepto-like kinaseAML-1/Runx1: Acute Myeloid Leukemia 1/Runt-Related Transcription Factor 1
BAMBI: Bmp and Activin Membrane-Bound Inhibitor
Bcl-2: B-cell Lymphoma
BFU-E: Brust-Forming Units Erythroid
BMP: Bone Morphogenetic Protein
CDK: Cyclin-Dependent Kinase
CFU-E: Colony-Forming Units Erythroid
CFU-GEMM: Colony-Forming Units Granulocytes, Erythroblast, Machrophages and Megakaryocytes
CFU-GM: Colony-Forming UnitsGranulocyte/Monocyte
cDNA: Complementary Deoxyribonucleic Acid
c-mpl: c-Myeloproliferative Leukemia Virus
CSF: Colony Stimulating Factors
DMSO: Dimethyl Sulfoxide
EPO: Erythropoietin
ERK: Extracelullar Signal-Regulated Kinases
Fast: Forkhead Activin signal Transducter
FGF: Fibroblast Growth Factor
FLGR: Follistatin-Related Gene
FSH: Follicule Stimulating Hormone
FST: Follistatin
GASP-1:GDF Associated Serum Protein-1
G-CSF: Granulocyte Colony-Stimulating Factor
GDF: Growth and Differentiation Factor
GH: Growth Hormone
GM-CSF: Granulocyte Macrophage Colony-Stimulating Factor
HSC: Haematopoietic Stem Cell
HPRT: Hypoxanthine guanine PhosphoRibosyl Transferase
IL: interleukin
LAP: Latency associated peptide
Lmo2: LIM domain only 2
MAPK: Mitogen-Activated Protein KinasesM-CSF: Macrophage Colony-Stimulating Factor
MIS: Müllerian Inhibiting Substance
MSTN: Myostatin
NK: Natural Killer

OAZ: Olfatory Neuron-Specific Transcription Factor-1/Early B-cell factor-like Associated Zinc Finger
Protein
PCR: Polymerase Chain Reaction
PRL: Prolactine
RNA: Ribonucleic Acid
RT-PCR: Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction
SCL/tal-1: Stem Cell Leukaemia/T CellAcute Leukaemia 1
Smad: Sma (small) + Mad (Mothers against dpp)
SMURF-1: Smads Ubiquitination Regulatory Factor-1
TLD: Tolloid
TGF-β: Transforming Growyh Factor-β
TPA: 12-O-Tetradecanolyphorbol-13-Acetate

1. INTRODUCCIÓN

Introducción
1.1. La superfamilia del TGF-β

La superfamilia del factor de crecimiento transformante β (Transforming
Growth Factor-β, TGF-β) comprende unostreinta factores de crecimiento y
diferenciación

que

regulan

un

amplio

rango

de

funciones

celulares

(proliferación, determinación, diferenciación, apoptosis, etc.) en todos los
metazoos estudiados. Estas acciones son ejercidas tanto a lo largo del
desarrollo embrionario como durante la vida adulta, participando, de esta forma,
1

en el mantenimiento de la homeostasis...