MOLECULAR RECOMBINANTE






AREA CIENCIAS DE LA SALUD
UNIDAD DE CIENCIAS QUIMICAS
PROGRAMA QUIMICO FARMACEUTICO BIOLOGO

BIOLOGIA MOLECULAR
Tecnología de DNA Recombinante


Dra. En C. Olga Yadira Barbosa Cisneros
Por: Roberto Carlos Sánchez de Santiago 6ºA


Tecnología de DNA Recombinante
La ingeniería genética es la rama de la ciencia que se ocupa de la manipulación de ADN de organismos vivos, loque permite una infinidad de aplicaciones como la creación de nuevas especies, corregir defectos genéticos y la fabricación de numerosos compuestos químicos que de otra forma serían imposibles de conseguir.
Los métodos de manipulación genética que se utilizan son muy complejos y se adecuan a las necesidades de cada caso. Intentaremos explicarlo del modo más simple posible para que todos puedanentenderlo:
Una de las técnicas que utiliza la ingeniería genética se basa en el uso de las llamadas enzimas de restricción. Estas enzimas tienen la capacidad de reconocer una secuencia determinada de ADN y extraerla del resto de la cadena. Otra clase de enzimas, las ligasas, se utilizan para volver a colocar el ADN en el núcleo de las células. Básicamente las enzimas de restricción funcionan comouna “tijera de ADN” mientras que las ligasas hacen de “pegamento” para insertar el ADN.
De esta manera es posible cortar la sección de ADN que se desea y volver a insertarla en otro organismo, o en otra parte de la cadena de ADN.
Otro proceso de manipulación genética son los vectores. Se llama vector a lo que sería una clonación propiamente dicha, es decir, una réplica del material genéticodentro de la célula huésped. Esto hace posible contar con múltiples copias de ADN, lo que proporciona una gran cantidad de material genético fiable con el que trabajar.
Recientemente se ha descubierto otra enzima que se utiliza en ingeniería genética. Se trata de la ADN polimerasa, que funciona de forma similar a los vectores, con la diferencia que se replica el ADN de manera exponencial en unareacción en cadena.
Por esta metodología es posible introducir genes de interés en todo tipo de células, empleando los vectores y las técnicas propias de cada sistema. Podemos entonces generalizar los pasos de la ingeniería genética de la siguiente manera:
1.     Identificar un carácter deseable en el organismo de origen.
2.     Encontrar el gen responsable del carácter deseado (gen de interés).3.     Combinar dicho gen con otros elementos necesarios (vector) para que éste sea funcional en el organismo receptor.
4.     Transferir el gen de interés, previamente introducido en el vector adecuado, al  organismo receptor.
5.     Crecer y reproducir el organismo receptor, ahora modificado genéticamente.



Por ejemplo, para el caso de la transferencia de un gen insecticida de unabacteria al maíz:
1.     Identificar la característica “resistencia a insectos” en el organismo de origen, la bacteria del suelo Bacillus thuringiensis.
2.     Encontrar al gen que lleva las instrucciones para esta característica.
3.     Combinar este gen con otros elementos genéticos para que sea funcional ahora en una planta (ligarlo a un vector).
4.     Transferir este gen a células demaíz (organismo receptor).
5.     Identificar las células de maíz que recibieron el gen (células transformadas) y regenerar, a partir de estas células, una planta adulta.

REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA
En Abril de 1983, Kary Mullis dio a conocer la Técnica de reacción en cadena de la Polimerasa o PCR que es una técnica para la síntesis "in Vitro" de secuencias específicas de DNA con lacual la insuficiente cantidad de ADN ya no es un problema en los procedimientos de Biología Molécular ni en los procedimientos de diagnóstico basados en el estudio de DNA.
La técnica se basa en la replicación del ADN en los organismos eucariotas realizada por la DNA polimerasa. Estas enzimas realizan la síntesis de una cadena complementaria de DNA en el sentido 5´-> 3´ usando un molde de cadena...