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OBTENCIÓN DE PÉPTIDOS BIOACTIVOS CON FUNCIÓN ANTI-HIPERTENSIVO
PARTIR DE LA PROTEÍNA ALFA-LACTOALBUMINA DE SUERO DE LECHE

ÍNDICE
1

1. Justificación ……………………………………………….………………………… 5
2. Objetivo general …………………………………………….………………………..5
3. Objetivo especifico ………………………………………….……………………….5
4. Antecedentes ………………………………………………….………………………6
4.1 Péptidos bioactivos ……………………………………….……………………...74.1.1 Péptidos inhibidores de la enzima convertidor de angiotensina ………….8
4.1.2 Péptidos hipocolesterolemicos ……………………………………………….9
4.1.3 Péptidos antioxidantes ………………………………………………………...9
4.1.4 Agentes antitromboticos y anticariogenicos ………………...……………..10
4.1.5 Péptidos opioides …………………………………………...………………..10
4.1.6 Agentes inmunomodulatorios ……………………………...………………..11
4.1.7 Péptidostransportadores de calcio …………………...…………………...11
4.1.8 Péptidos con actividad antimicrobiana ………………..…………………...11
4.2 Suero lácteo ………………………………………………..…………………..12
4.2.1 Proteínas del suero ……………………………………..……………………12
4.3 Síntesis química de péptidos …………………………………..……………..13
4.3.1 Síntesis de péptidos en fase solida ………………………..……………….14
4.4 Obtención de péptidos teniendo como precursor proteínas de leche…….14
4.4.1 Hidrólisis enzimática …………………………………………………….……14
4.4.2 Fermentación microbiana ……………………………………………………14
4.5 Limitaciones en la producción comercial de péptidos bioactivos ……….…15
4.6 Purificación de péptidos …………………………………………….………….15
4.6.1 Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) …………………………15
4.6.2 Cromatografía por exclusión de tamaño …………………………………...15
4.6.3 Cromatografía deintercambio iónico ……………………………………….16
4.6.4 Cromatografía de fase reversa ……………………………………………...16
4.7 Técnicas para la caracterización de péptidos ……………………………….17
4.7.1 Espectrometría de masas ……………………………………………………17
4.7.2 Degradación de Edman………………………………………………………………………………….17
4.8 Evaluación de actividad biológica ……………………………………………18
4.7.3 Electroforesis capilar………………………………………………………………………………………184.8.1 Pruebas in vivo ………………………………………………………………18
4.8.2 Pruebas in vitro 18
2

4.8.3 Métodos para evaluar la actividad biológica de péptidos ……………….18
4.9 Métodos de evaluación de la actividad inhibitoria de la ECA ……………..18
4.9.1 Métodos espectrometricos …………………………………………………19
4.9.2 Método flourimetrico …………………………………………………………19
4.9.3 Método cromatografico ………………………………………………………19
4.9.4Métodos radiométricos e inmunológicos …………………………………..20
4.10 Micro-encapsulación ………………………………………………………….20
4.10.1 Técnicas de micro encapsulación …………………………………………21
4.10.2 Secado por aspersión ………………………………………………………21
4.10.3 Polimerización interfacial …………………………………………………..22
4.10.4 Incompatibilidad polimérica ………………………………………………..22
4.10.5 Coacervación ………………………………………………………………..22
4.10.6Liposomas …………………………………………………………………...23
4.10.7 Gelificación iónica …………………………………………………………..23
4.10.8 Coberturas utilizadas en microencapsulacion …………………………...23
4.10.9 Métodos de liberación ………………………………………………………25
4.11 Biodisponibilidad de los péptidos inhibidores de la enzima convertidora de
angiotesina-1 ………………………………………………………………………...25
4.11.1 Digestión gastrointestinal …………………………………………………..264.11.2 Absorción intestinal …………………………………………………………26
4.11.3 Estabilidad en sangre ………………………………………………………27
5. Materiales y métodos ………………………………………………………………28
5.1 Concentración de alfa-lactoalbumina …………………………………………29
5.1.1 Filtración del suero …………………………………………………………...29
5.1.2 Precipitación fraccionada ……………………………………………………29
5.1.3 Cromatografía de intercambio iónico ………………………………………29
5.1.4.Adsorción de proteínas sobre el soporte de intercambio iónico ………..30
5.1.5 Desorción ……………………………………………………………………...30
5.1.6 Fraccionamiento de proteínas ………………………………………………30
5.1.7 Hidrólisis enzimática …………………………………………………………31
5.1.8 Péptidos ……………………………………………………………………….31
5.2 Microencapsulacion de los péptidos ………………………………………….33
5.3 Formulación final ………………………………………………………………..34...