Muestreo De Superficie Y Ambiente

CARRERA DE AGROINDUSTRIA ALIMENTARIA
Laboratorio de Microbiologia
de Alimentos Zamorano
(LMAZ)
Thelma Francisca Calix, Ph.D.
Jefe LMAZ

Ing. Hector O. Lopez U.
Instructor LMAZ
LABORATORIO # 3
Muestreo de Superficies y Ambiente

INTEGRANTES:

* ISABEL OSTRIA 13304
* GUILLERMO OSORIO 13201

SECCION DE LABORATORIO: B 6

JUEVES 9 DE FEBRERO DEL 2012
Introducción
Losanálisis microbiológicos se llevan a cabo no solamente en el producto final, si no en todo el proceso que conlleva, tanto ambiente como superficies donde se lleva cabo la manipulación de alimentos. Para el muestreo de ambiente y superficies se realizan distintas técnicas; como en superficies un hisopo humedecido en un medio de cultivo o una placa RODAC (Replicate Organism Direct Agar Contact)(1) o(Replicate Organism Detection and Counting), y para ambiente se disponen placas petri destapadas con medio de cultivo. Una vez tomadas las muestras se deben evitar acciones que incremente o disminuyan la carga microbiana.
Objetivos:
* Comprender distintas técnicas de muestreo para la recolección de microorganismos utilizadas en la industria de alimentos.
* Diferenciar el empleo de las técnicaspara distintos casos.
Materiales
Muestreo de superficie
* 1 Hisopo estéril.
* 1 tubo de ensayo con 10ml de agua peptonada.
* 8 placas petri, para realizar una muestra duplicada de tal forma esta sea representativa.
* Medio de cultivo PCA
* 1 marco de aluminio de 100cm2 , para poder tener una resultado en determinado espacio y poder extrapolar los datos.
* 2 placas RODAC(Replicate Organism Detection and Counting), de 23cm2.
* Par de guantes
* Botella de alcohol para la desinfección de guates antes y después, de realizar una toma de muestra.
Muestreo de ambiente
* 6 platos con medio PCA. Incubar a 35°C por 48hr.
Descripción o Contendido.
La clase se subdividió en grupos para la recopilación de muestras en distintos lugares donde se procesan alimentosen Zamorano Cada pareja contaba con los siguientes materiales para la recopilación de la muestra y siembre del mismo:
Para toma de superficie; con hisopo, se realizó en las uñas de una sola mano en un estudiante, que cursaba el modulo de panificación, se introdujo en hisopo en el agua peptonada, y girando suavemente el hisopo sobre cada uña devolvemos el hisopo al tubo de ensayo y lo quebramospara cerrar el tubo de ensayo. La primera muestra RODAC fue sobre la tabla para picar guayaba, la segunda sobre mesa de producto final.
El muestreo de ambiente fue realizado en el laboratorio de microbiología, destapando 5 placas petri, una de sexta tapada como muestra, y el resto de placas se cerraron en intervalos de cinco minutos en un total de 25 minutos.
Resultados y Discusión:
Zona demuestreo | Medio de cultivo | Método de muestreo |
Uñas mano derecha | PCA | Hisopo |
Tabla para picar | VRBA | RODAC |
Mesa producto final | VRBA | RODAC |
Conteo 48 horas después de la siembra en platos y el contado. Cuadro 1 y 2.
Tiempo (min) | Conteo |
0 | 2 |
5 | 9 |
10 | 11 |
15 | 35 |
20 | 38 |
25 | 40 |


Figura 1. Infección de los medios de cultivo en el ambiente enfunción del tiempo, siendo el eje Y cantidad de UFC, y el eje X tiempo.
Seis muestras, la primera de control para asegurarnos que no hubo contaminación previa en el medio de cultivo y esta no afecto los resultados. Los cinco platos petri destapados presentaron un crecimiento de microorganismos elevado en el lapso de 10 a 15min de 11 a 35 UFC, a partir de los 15 minutos hasta llegar a los 25 lasunidades formadoras de colonia aumentaban de 3 en 3 sin ser muy significativo en relación a un documento encontrado(2).
Conteo de Hisopado de uñas en diluciones. Cuadro 3.
Repetición | Dilución | Medio de cultivo | Zona de muestreo | Método de muestreo | Conteo | Promedio |
1 | 100 | PCA | Uñas de estudiante | Hisopado | 1:1 | 200.5 |
| | | | | 191 | |
2 | 100 | PCA | Uñas de...