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Consiste en resembrar el microorganismo cada cierto tiempo en un medio adecuado; generalmente se utiliza agar inclinado ya que en medio sólido se detectan mejor los contaminantes que en medio líquidoy el hacerlo inclinado tiene por objeto el evitar la desecación rápida del medio. Los subcultivos aumentan las posibilidades de aislamiento, ya que algunas cepas no crecen en el agar inoculadoinicialmente. A. Con la aguja inoculadora estéril, transferir del cultivo stock de E. coli a un tubo hondo con agar Nutritivo. Esto se hace sumergiendo la aguja con el inóculo dentro del tubo sin tocar lasparedes de éste, penetrando el medio a 2/3 partes del fondo y la aguja es retirada del tubo (figura 3 a, b y c).
B. Con el asa estéril, transferir del cultivo stock de E. coli a un caldo de cultivolíquido.
C. Con el asa estéril, transferir del cultivo stock de E. coli a un tubo inclinado. Esto se hace rayando suavemente la superficie del tubo inclinado en forma de serpiente parecido a una S(figura 3d).
D. Colocar los tubos inoculados en una gradilla e incubarlos a 35 °C por 24 a 48 horas. Después de este tiempo examinar todos los tubos para ver la presencia de crecimiento bacteriano. Elcrecimiento es indicado por la turbidez en el cultivo del caldo; en el cultivo del tubo inclinado el crecimiento se aprecia por la presencia de colonias bacterianas que se han desarrollado; en el tubohondo, solo se aprecia una línea de inoculación que corresponde al crecimiento (Completar la tabla descrita en el punto 3).

METODO.
1. Técnica aséptica para siembra.
A. Utilizando un plumón o(marcador de cera), marque los tubos o placas que van a ser inoculados con fecha, nombre del alumno y el nombre del microorganismo.
B. Mezclar el tubo del cultivo puro (cultivo stock) para suspenderhomogéneamente a las bacterias. Para mezclarlo se podrá usar el vórtex.
C. En presencia del mechero, con la palma de la mano, colocar el tubo del cultivo puro (cultivo stock) y el tubo a donde va a...