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Protocolo del instrumento QIAsymphony SP
Tissue_LC_200_V7_DSP y Tissue_HC_200_V7_DSP
Información general
Para el diagnóstico in vitro. Estos protocolos sirven para la purificación del ADN total procedente de tejidos y de tejidos fijados con formalina e incorporados en parafina (FFPE) mediante el instrumento QIAsymphony® SP y el kit QIAsymphony DSP DNA Mini. Actualmente se están desarrollandoprotocolos para células cultivadas y cultivos bacterianos que estarán disponibles en breve. En función del tipo de muestra recomendamos usar un protocolo de bajo contenido (LC) o de alto contenido (HC). Los tejidos proporcionarán valores de ADN mayores si se procesan con el protocolo de alto contenido, pero se puede utilizar el protocolo de bajo contenido en combinación con un volumen de eluciónreducido (50 μl), si se necesita una concentración elevada de ADN. Para los tejidos FFPE recomendamos utilizar el protocolo de bajo contenido.

Protocolo de bajo contenido
Kit Material de muestra QIAsymphony DSP DNA Mini Kit (n.° de catálogo 937236) Tejido FFPE y tejido* En una preparación se pueden combinar hasta 4 cortes de tejido FFPE, cada uno con un grosor máximo de 10 μm, u 8 secciones conun grosor máximo de 5 μm y una superficie máxima de 250 mm2. Nombre del protocolo Juego de controles del Tissue_LC_200_V7_DSP ACS_Tissue_LC_200_V7_DSP

ensayo predeterminado Volumen de elución Versión requerida
* Consulte el protocolo de alto contenido para obtener información sobre las muestras de tejidos.

50 μl, 100 μl, 200 μl o 400 μl Versión 4.0

del

software

Abril de 2012 Sample& Assay Technologies

Protocolo de alto contenido
Kit Material de muestra QIAsymphony DSP DNA Mini Kit (n.° de catálogo 937236) Tejido Si no se dispone de información sobre el rendimiento esperado, recomendamos comenzar con 25 mg de material de muestra. En función del rendimiento obtenido, se puede aumentar el tamaño de la muestra en las preparaciones subsiguientes. Nombre del protocolo Juegode controles del Tissue_HC_200_V7_DSP ACS_Tissue_HC_200_V7_DSP

ensayo predeterminado Volumen de elución Versión requerida del software 100 μl, 200 μl o 400 μl Versión 4.0

Materiales necesarios pero no suministrados
Para todos los tipos de muestras
Tampón ATL, 4 x 50 ml (Buffer ATL, 4 x 50 ml, n.º de catálogo 939016) Si necesita ADN libre de ARN: ARNasa A libre de ADNasa (solución madre de100 mg/ml)

Para tejidos FFPE (desparafinización sin xileno)
Solución de desparafinización (Deparaffinization Solution, n.º de catálogo 939018)

Para tejidos FFPE (desparafinización con xileno)
Xileno (99–100%) Etanol (96–100%)*

* No utilice alcohol desnaturalizado que contenga sustancias adicionales como p. ej. metanol o metiletilcetona.

Protocolo del instrumento QIAsymphony SP:Tissue_LC_200_V7_DSP y Tissue_HC_200_V7_DSP

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Cajón “Sample” (Muestras)
Tipo de muestra Volumen de entrada de muestras Volumen procesado Tubos primarios Tubos de muestra Para obtener más información, consulte de muestra n/a de muestra 200 μl Tejido FFPE y tejido 220 μl (necesarios por muestra, por protocolo)*

secundarios Insertos

www.qiagen.com/goto/dsphandbooks. Dependendel tipo de tubo de muestra utzilizado; para obtener más información, consulte www.qiagen.com/goto/dsphandbooks.

* Debido a que la transferencia de muestras de los protocolos de alto y bajo contenido se realiza sin detección del nivel de líquido, el sistema no detectará si el volumen de la muestra es inferior a 220 μl. Por ello deberá asegurarse de que el volumen de entrada de la muestra sea 220μl. n/a = no aplicable.

Cajón “Reagents and Consumables” (Reactivos y consumibles)
Posición A1 y/o A2 Posición B1 Soporte de gradillas de Cartucho de reactivos n/a Puntas con filtro desechables, 200 μl o 1.500 μl

puntas 1–17 Soporte de caja unitaria 1–4 Cajas unitarias que contienen cartuchos de preparación de muestras o cubiertas para 8 barras

n/a = no aplicable.

Protocolo del...