MUTACIONES EN LA TUBULINA α Y β MICROTUBULOS Y CONFIEREN RESISTENCIA A VINBLASTINA

MUTACIONES EN LA TUBULINA α
Y β
MICROTUBULOS Y CONFIEREN RESISTENCIA A
VINBLASTINA1

QUE ESTABILIZAN
LA COLCEMIDA Y

Malahati Hari 2 , Yaqing Wang, Sudha Veeraraghavan, y Fernando CabralDepartamentos de Biología integrativa y Farmacología [M.H., H.W., F.C.] y Bioquímica y Biología Molecular [S.V.], University of
T exas-Houston Medical School, Houston, T exas 77030.

RESUMENSelecciones de un solo paso fueron usadas para obtener líneas células de ovario de hámster chino resistentes a
la Colcemida y vinblastina. El Verapamilo fue incluido en las selecciones para elud ir laaislación de células
con glicoproteína P mediada con resistencia a múltiples fármacos y, por lo tanto, enriquecer las células con
alteraciones de la tubulina. Las líneas celulares aisladas fueron 2 vecesresistentes al fármaco seleccionado,
exhibieron resistencia cruzada a otros fármacos que inhibían el ensamblaje del microtúbulo, y había mejorado
la sensibilidad al fármaco estabilizador delmicrotúbulo, paclitaxel. La resistencia concomitante a los
fármacos desestabilizante del microtúbulo y mayor sensibilidad al paclitaxel sugieren que estas líneas
celulares tienen cambios en el ensamblajedel microtúbulo. De acuerdo con esta interpretación, las líneas
celulares fármaco resistente exhibieron movilidad alterada de la tubulina α o β en geles de dos dimensiones y
niveles más altos (47-54%)de tubulina ensamblada comparada con el normal (wild -type) (39%) o células
resistentes al paclitaxel (25%). Algunas células resistentes a los fármacos también tenían paquetes de
microtúbulos ajuzgar por la inmunofluorescencia. La secuencia genómica de 11 líneas celulares fármaco
resistentes predijeron cinco alteraciones diferentes (D45Y, C211F, D224N, S234N, y K350N) en la tubulina β
ycuatro alteraciones diferentes (H283Y, E55K, A383V, y R390C) en la tubulina α. Las sustituciones de
aminoácidos están dispersos en las estructuras primarias y terciarias de la tubulina y, junto con...