Mycobacterium

Desarrollo de una prueba de susceptibilidad de Mycobacterium tuberculosis mediante el índice de ácidos micólicos
José M. Viader Salvadó*,**, Rolando Tijerina Menchaca**, Elvira Garza González**, Martha Guerrero Olazarán*,**

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a tuberculosis (TB) es actualmente un problema de salud mundial. Su alta incidencia es parcialmente debida a la aparición de cepas multidrogoresistentes. Esteproblema se complica porque las pruebas de susceptibilidad de Mycobacterium tuberculosis, usadas generalmente en los laboratorios clínicos, están basadas en el crecimiento del microorganismo en un medio sólido o líquido, en presencia o ausencia de la droga antituberculosa después de un mínimo de tres semanas de incubación, que es un tiempo muy largo para ajustarse a las recomendaciones propuestas por elCentro para el Control y Prevención de Enfermedades (CDC) de Estados Unidos para un laboratorio micobacteriológico eficiente.1 Por tal razón, las pruebas de susceptibilidad de M. tuberculosis rápidas son esenciales y deben de ser realizadas para un control eficiente de la tuberculosis. Actualmente están disponibles varias de estas pruebas rápidas.2 Los ácidos micólicos son β-hidroxiácidos-α-alquilramificados de alto peso molecular componentes de la pared celular de microorganismos del género Corynebacterium, Rhodococcus, Nocardia, Gordona, Tsukamurella y Mycobacterium. Por lo tanto, la presencia de estos compuestos en una muestra clínica o en un cultivo aislado de ésta indica la presencia de un microorganismo de estos géneros. W.R. Butler y cols.3 desarrollaron un método para el análisisde derivados p-bromofenacílicos de ácidos micólicos empleando la cromatografía de líquidos de alta resolución (CLAR) y lograron diferenciar los patrones cromatográficos de ácidos micólicos de los géneros Corynebacterium, Rhodococcus, Nocardia y Mycobacterium. Posteriormente,4 esta-

blecieron un esquema de diferenciación de distintas especies micobacterianas mediante su patrón cromatográfico deácidos micólicos. Adicionalmente, el grupo de usuarios de CLAR (HPLC users group) publicó una estandarización de este método de identificación de micobacterias5 y una colección de patrones estándares de ácidos micólicos.6 En 1995, K.C. Jost y cols.7 describieron una modificación de este método basado en el uso de una cumarina como agente derivatizante de ácidos micólicos, lo cual permitió ladetección de micobacterias directamente de muestras clínicas.7,8 Siendo los ácidos micólicos componentes bioquímicos de las micobacterias, si existiera una relación entre el contenido de ácidos micólicos (o de un parámetro fisicoquímico directamente proporcional al contenido de ácidos micólicos) de un cultivo de Mycobacterium tuberculosis y las unidades formadoras de colonia (UFC) por mililitro delmismo cultivo obtenidas mediante el método tradicional de cuenta en placa, después de incubar un mínimo de tres semanas en medio Middlebrook 7H10, se podría utilizar el contenido de ácidos micólicos como estimador del crecimiento micobacteriano y utilizarlo en pruebas de susceptibilidad. Con esta hipótesis, en el presente trabajo se desarrolló y evaluó una prueba de susceptibilidad a antifímicos deMycobacterium tuberculosis mediante un índice de ácidos micólicos (IAM).

* Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Biológicas. ** Departamento de Microbiología, Facultad de Medicina, UANL. E-mail: jviader@ccr.dsi.uanl.mx

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CIENCIA UANL / VOL. VI, No. 2, ABRIL-JUNIO 2003

JOSÉ M. VIADER SALVADÓ, ROLANDO TIJERINA MENCHACA, ELVIRA GARZA GONZÁLEZ, MARTHA GUERREROOLAZARÁN

Estrategia experimental
Para cumplir con el objetivo propuesto en este trabajo, se plantearon dos etapas para el proyecto. En primer lugar, se realizó una correlación del contenido de ácidos micólicos (o de un parámetro fisicoquímico directamente proporcional al contenido de ácidos micólicos) de un cultivo de M. tuberculosis y las UFC/mL del mismo cultivo obtenidas mediante el...