Métodos de siembra

ÀREA DE CIÈNCIES EXPERIMENTALS


CURS 1AIC
AM

9/11/2013
Métodos de siembra


Métodos de siembra

Objetivos:
Aprender a realizar los diferentes tipos de siembra, y ver el resultado.


Materiales:

Bec Bunsen
Nansa de Kolle
Pipetas esterilizadas(1ml, 10mL)
Nevera
Tubos esterilizados
Estufa 37ºC y 45ºC
Etanol
Bolígrafo Permanente
Papel de laboratorio
Pim-pumpCerillas
Placas de Petri


MEDIOS DE CULTIVO:
Brou

PCA

Ringer (No es un medio de cultivo)

EMB

Manitol

Mc Conkey

CULTIVOS DE BACTERIAS:

E.Coli

Salmonella

Serratia

Pseudomones

S. Epidermis








Procedimiento:

Primero de todo desinfectar la zona de trabajo con etanol y secarla con papel, y proteger con papel la zona de trabajo, y montar el Bunsen paratener la zona estéril.

Siembra en Brou:

1Cogimos el Brou, y dos tubos de ensayo esterilizados.
2 Marcamos cada uno nuestra bacteria nombre y medio.
3 Cerca del Bunsen abrimos el papel de plata del vaso que contenía Brou, después abrimos el tubo de ensayo con el dedo meñique y vertimos el Brou dentro de él (Siempre cerca de bunsen, y al abrirlo el tubo y el Brou flamear por la llama deBunsen) y lo cerramos.
4 Después cogimos la Nansa de Kolle y la esterilizamos con la llama de Bunsen abrimos la placa de Petri que contenía la bacteria E.Coli y cogimos la bacteria y la depositamos en el tubo de Brou (previamente flameado con la llama del bunsen), con la nansa dando golpes a las paredes del tubo para que las bacterias se depositaran todas.
5 Flameamos el tubo y lo cerramos, yesterilizamos la Nansa de Kolle.
6 Dejamos los tubos de Brou con E.Coli en la estufa de 37ºC.




Siembra en estría en Agar inclinado:

1 Cogimos los tubos previamente preparados de la práctica anterior.
2 Elegimos salmonella como bacteria.
3 Esterilizamos la Nansa de Kolle con la llama del Bunsen.
4 Abrimos el tubo de ensayo con el dedo meñique y lo flameamos con la llama del bunsen.
5Recogimos las bacterias de la placa de Petri con la Nansa de Kolle.
6 Con la Nansa hicimos la siembra en la superficie del PCA inclinado (Haciendo un Zig-Zag).
7 Volvimos a flamear la boca del tubo y lo cerramos.
8 Lo rotulamos y lo depositamos en la estufa de 37ºC.


Siembra en masa:
1 Cogimos una pipeta esterilizada de 10mL, y un Pim-Pump de la clase de micro (Azules)
2 Abrimos el Ringer y loflameamos en la llama del bunsen.
3 Cerca del Bunsen, medimos 3mL en la pipeta.
4 Abrimos un tubo de ensayo (Con el tapón sujetado con el dedo meñique) y también lo flameamos y depositamos los 3 mL de Ringer.
5 Esterilizamos la Nansa de Kolle, y recogimos E.Coli de la placa.
6 Depositamos con la Nansa las bacterias en el tubo de ensayo.
7 Lo flameamos y lo cerramos.
8 Lo movimos para que sedisolviera bien (Le dábamos golpes con el dedo a la parte de abajo del tubo)
9 Cogimos una placa de Petri vacía.
10 Con otra Pipeta esterilizada recogimos 1mL del tubo de ensayo.
11 Lo depositamos con la pipeta en la placa, y después la rellenamos de PCA (Previamente flameado el Erlemneyer en la llama del Bunsen).
12 Cerramos la placa, y la movimos con cuidado 10 veces de izquierda a derecha,y 10 veces de norte a sur.
13 La rotulamos con el nombre y la bacteria.
14 La depositamos en la estufa de 37ºC.

Siembra en estría:
1 Cogimos un total de 8 placas de Petri (PCA preparado de la práctica anterior), y las rotulamos con nuestro número de grupo y la partimos con una línea para separar una bacteria de la otra y colocamos el nombre de la bacteria asignada. (Serratia con Pseudomanesy E.Coli con Salmonella).
2 Hacíamos una Placa cada uno, siempre cerca del la llama del Buensen.
3 Esterilizábamos la Nansa de Kolle, cogíamos la bacteria abríamos la placa y la depositábamos en forma de (ZIG-ZAG) en la mitad de la placa ya dividida por la rotulación.
4 Cada vez que terminábamos la siembra esterilizábamos de nuevo la Nansa de Kolle, para la siguiente siembra.
5 Teníamos que...