nada

Composición General del Medio de Cultivo.
• Sales: CaCl2, NaHPO3, MnSO4, SnCl2, etc).
• Aminoácidos: Ala, Val, leu, aAsp, Gly…
• Vitaminas (Biotina, ác. Fólico, pantotenato de sodio, riboflavina.
• Otros Componentes (glucosa, ác. Linoléico, rojo de fenol, timidina).

1. Suero o substitutos del suero.
2. L-Glutamina.
3. Antibióticos.
4. Factores de crecimiento adicionales.

* hormonas,anticuerpos, el medio no debe estar suplementado.

Mezclas de Sales Basales.
Solución Salina Equilibrada o Buffer (BSS) en el cultivo de células y tejido.
En 1885, Sydney Ringer desarrolló una solución de sales inorgánicas para mantener la
contractilidad del tejido cardiaco de mamífero.
Una solución de sal de menos específica fue diseñada por Tyrode para su uso en el
trabajo con célulasprimarias de mamífero. Solución de sal de Tyrode , fluido aceptada
para la dilución de componentes proteicos.
La función actual de la solución de sal equilibrada (buffer) en el cultivo celular es
multifacética y puede dividirse en cuatro funciones principales.
•Fluido de irrigación, transporte y diluyente, mantiene el equilibrio osmótico intra y extracelulares.
• Proporciona a las célulasciertos iones inorgánicos esenciales para ee metabolismo normal célular.
• Combinado con hidrato de carbono (glucosa), fuente de energía principal para el metabolismo celular.
• Ofrece sistema de tamponamiento para mantener el medio en el intervalo de pH fisiológico (7.2 a 7.6).

Contienen un requisito básico para cinco iones: Ca, Mg, K, Na PO4.

8823
9628642
Product N

Nombre

Bicarbonatode sodio

Cambio de pH
Glucosa
durante filtración

No contiene

Menos
susceptible

Sales equilibradas de Earle
(EBSS)

2,2 g / L

Sales equilibradas de Hanks
(HBSS)

0,35 g / L

Pueden requerir
el ajuste después 1,0 mg / L
de la filtración.

El fosfato de Dulbecco
tamponada con solución
salina (D-PBS).
1.0 M, pH 7.4 (25 °C)

Con y sin

Estabilización del pH en elMedio de Cultivo.
El balance ácido-base es mantenido por NaHCO3, buffer y componente nutricional.
Si [CO2 ]

, el pH

, lo cual es neutralizado por una elevada [NaHCO3].
específica p/c medio.

pH opt. =7.4.
Sistema buffer dentro del medio de cultivo.
NaHCO3 + H2O
Na+ + H2CO3 + OH-

NaHCO3 disociado y CO2.

Na+ + HCO3- + H2O.
Na+ + H2O + CO2 + OH-.
Depende del CO2 atm.

Cuandola presión parcial del CO2 es baja, el equilibrio

, el medio [OH- ] y
se torna básico.

Incubadora entrada de CO2.
La capacidad buffer del sistema :
H+ + HCO3
H2CO2 

CO2 + H2O.

una elevada concentración de OH- causa OH- + H2CO2

HCO3 + H2O.

pK

.

H2CO3

HCO3- + H+

6.37, 6.35*

HCO3

CO3- + H+

10.33*
*Valor termodinámico

Medio conteniendo Suero.
Es elsuplementó más frecuente.
Razones:
Algunas células sólo proliferan al adicionarle suero.
Provee biodisponibilidad de hormonas.
Incrementa la capacidad buffer del medio.
El medio extracelular óptimo a las células.
El suero es una mezcla compleja y heterógenea de proteínas, hormonas,
factores de crecimiento, iones y otros componentes no definidos.
Medio no definido, suero varía de lote a lote.Medios definidos , sin suero pero con apropiados suplementos.
Diferentes animales.
Rebaños.
Razas.
Países.

El Suero Fetal de Bovino (SFB) es el
suplemento de crecimiento más empleado
para el medio de cultivo celular, Contiene
un alto contenido de factores que
promueven el crecimiento, ya sean
definidos o no definidos , los cuales
satisfacen los requerimientos metabólicos
para elcultivo celular.

SFB
Producto. Sterile-filtered, suitable for cell culture .

Origin

Fetal Bovine Serum. Australia origin, USDA approved.

Endotoxin

Hemoglobin,
≤25 mg/dL

≤10 EU/mL
endotoxin

Charcoal
Hemoglobin,
≤20 mg/dL
Stripped
Dialyzed by
ultrafiltration Hemoglobin,
against 0.15 M ≤20 mg/dL
NaCl

≤10 EU/mL
endotoxin

Heat
Inactivated

Hemoglobin,
≤20...