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AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS DE AGUA MEDIANTE LA TÉCNICA DEL NÚMERO MÁS PROBABLE

I. INTRODUCCIÓN
El método del número más probable fue descrito por Mc Crady en 1915 y actualmente sigue siendo ampliamente utilizado. En un principio este método fue empleado para estimar el número de microorganismos en muestras de alimentos y aguas. Sin embargo, se ha demostrado que también puede seraplicado para la determinación de microorganismos aerobios y anaerobios en lodos, sedimentos marinos y Análisis microbiológicos de suelos contaminados.
El método del Número Más Probable (NMP), o llamado también llamado método de los tubos múltiples, es un método alternativo que permite efectuar el recuento de cifras bajas de microorganismos, viables, por ejemplo, menos de uno por mL. Proporciona unaidea aproximada del número de bacterias vivas presentes en una muestra de alimento, que pueden multiplicarse en una medio de cultivo líquido determinado. El medio de cultivo a elegir depende del tipo de microorganismo que se desea contar, por tanto se pueden utilizar medios de enriquecimiento selectivos, ó medios de propagación.
Es útil para determinar el número de diversos tipos demicroorganismos presentes en una muestra de alimento. Así, utilizando los medios de cultivo apropiados, se puede determinar el número de coliformes y E. Coli, enterococos, estafilococos, salmonella, etc.
El método se fundamente en la determinación de la presencia o ausencia de un determinado tipo de microorganismo (en función de que crezcan o de que produzcan determinada reacción en el medio o no), endiferentes cantidades de muestra en la que todavía hay crecimiento microbiano.
Este método es útil para determinar cargas microbianas bajas, pero tamicen puede emplearse para determinar cargas mayores utilizando las diluciones apropiadas. Así mismo, es el único método a utilizar en el caso de muestras como por ejemplo polvos insolubles, en los que no es aplicable el método de filtración nirecomendable el de placas debido a la presencia de partículas.
Se prefiere también este método cuando los microorganismos son de lento crecimiento, o cuando han sido sometidos a condiciones adversas (temperatura alta, desecación, etc.). Es posible enumerar también microorganismos anaerobio utilizando medio pre reducido, que se cubren con vaselina o parafina luego de inocular o incubar en condicionesanaerobias.
Los principios fundamentales de esta técnica son (1) dispersión de una muestra en un diluyente apropiado (solución fisiológica), (2) distribución de una alícuota a un medio apropiado de crecimiento, (3) incubación bajo condiciones óptimas, y (4) conteo de las colonias desarrolladas o lectura de tubos NMP
II. OBJETIVOS
 Determinación de bacterias en el agua para así establecer si estáes o no apto para el consumo humano.
 Determinación de las bacterias coliformes totales en el agua.
 Determinación de bacterias coliformes fecales en el agua.

III. FUNDAMENTO TEÓRICO.
La técnica del número más probable
Existen diversos métodos para cuantificar el número de microorganismos presentes en muestras líquidas y sólidas. Dentro de las técnicas más comunes se encuentra elrecuento directo por microscopia de fluorescencia, así como los procedimientos basados en diluciones en serie, haciendo crecer microorganismos en medios de cultivo sintéticos sólidos o líquidos, como el recuento en placa de Unidades Formadoras de Colonias (UFC) o la estimación por el método del Número Más Probable (NMP).
Este último es muy adecuado para determinar bacterias anaerobias, porque permitemantener un ambiente anaerobio dentro de los tubos, sin necesitar de sistemas anaerobios más complejos como cámaras o jarras anaerobias. La presencia de oxígeno es el principal factor de interferencia, por lo que se deben conservar las condiciones anaerobias durante toda la técnica.
En función de estos se puede considerar como positivos aquellos tubos en los que:
 Hubo crecimiento
 Hubo...