no nada

Agronomia Costarricense 20(2): 187-204. 1996

Actualizaci6n

EL CULTIVO

DE PROTOPLASTOS
EN CITRICOS
YSU
PARA EL MEJORAMIENTO
GENETICO1

POTENCIAL

VIctor M. Jimenez *

ABSTRACT
Protoplast culture in citrus and its potential for genetic improvement.
Techniques that involve isolation, culture and regeneration of citrus protoplasts
for genetic improvement are reviewed. Thespecies and cultivars from which
viable protoplasts were obtained are listed. Also, plants regenerated through fusion experiments, cybrid formation and genetic transformation of protoplasts
are described. Potential uses of these techniques and their applications are discussed, emphasizing protoplast fusion, which has evolved to a higher degree.

INTRODUCCI6N
Los cftricos constituyen el principalproducto frutfcola en el comercio mundial. A pesar de su
alta capacidad para hibridarse en forma interespecffica e incluso intergenerica, la aplicacion efectiva de programas de mejoramiento genetico tradicional se ha visto limitada por una serie de factores biologicos propios del grupo, dentro de los
cuales se incluyen una biologfa reproductiva muy
compleja y perfodos de juvenilidad prolongados(Grosser y Gmitter, 1990a; Grosser, 1992). Algunas de estas limitantes pueden obviarse en gran
medida mediante la utilizacion de tecnicas biotecnologicas, que involucran entre otras: el cultivo in
vitro, el aislamiento, cultivo, regeneracion, fusion
y transformacion de protoplastos, y la formacion
de cfbridos. Estas tecnicas permiten la incorporacion de caracterfsticas geneticas que son degran
utilidad para conferir resistencia 0 tolerancia contra enfermedades, plagas y condiciones adversas
(edaficas, climaticas, etc.), que afectan el rendimiento, asf como para mejorar la calidad del fruto.

II
*

Recibido publicaci6n dediciembre 1995.
para
ell
de
Cen~ro Investig.aciones
para
enGranos ~emillas,
y
Universldad de Costa RIca, San Jose, Costa RIca.

La diversidad geneticaque existe entre las
especies de Citrus y los generos emparentados es
muy grande y ha sido poco estudiada. En el Cuadro 1 se observa que la Subtribu Citrinae (Subtribu 2 de la Tribu Citreae, Subfamilia Aurantiodiae,
Familia Rutaceae) a la cual pertenece Citrus, ha
sido dividida en tres grupos subtribales, que contienen en total 28 generos y 125 especies (Swingle
y Reece, 1967).
En elpresente trabajo se hace una descripcion actualizada sobre el uso del cultivo de protoplastos como metodo para el mejoramiento genetico de cftricos, con enfasis en la fusion de protoplastos, que es la metodologfa que ha tenido mayor desarrollo.

AISLAMffiNTO
DE PROTOPLASTOS
Y REGENERACI6N
DE PLANTAS
La manipulacion de protoplastos y la regeneracion de plantas a partir de ellos es una herramientainnovadora en programas de mejoramiento
genetico. Estos protoplastos provienen de celulas
alas cuales se les ha eliminado la pared celular, ya

seapor mediosmecanicos mediante
0
digestion
enzimatica. La unica barrera entonces entre el pro-

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AGRONOMIA

COST ARRlCENSE

Cuadro I. Generos pertenecientes a la familia Rutaceae y la subfarnilia Aqrantiodeae (Swingle y Reece, 1967).Entre parentesis se
indica el nurnero de especies en el genero; y en negrita, aquellos en los que se ha tenido cierto exito al hibridarlos somaticarnente con Citrus (modificado de Grosser y Grnitter, 199Oc).

TRIBU I.

Clauseneae

Subtribu I.
Subtribu2.
Subtribu3.

Micromelinae
Clauseninae
Merrillinae

TRIBU II.

Citreae

Subtribu I.

Triphasiinae

Subtribu2.

Subtribu3.Clausena(23)

Wenzelia
(9)
Oxanthera(4)

Triphasia (3)
Luvunga(12)

Monanthocitrus
Merope

Pamburus
Paramignya(15)

Citrinae

Severinia (6)
Burkillanthils
Hesperathusa
Atalantia (II)

Fortunella (4)
Poncirus (2)
Microcitrus (6)*

Pleiospennium
(5)
Limnocitrus
Citropsis (11)

Eremocitrus
Clymenia
Citrus (16)

Balsarnocitrinae

Swinglea

Balsamocitrus...