nom 055

URIC ACID -LQ

Acido úrico
Uricasa -POD. Líquido
4.
5.

Determinación cuantitativa de ácido úrico
IVD
Conservar a 2-8ºC
PRINCIPIO DEL METODO
El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de
hidrógeno (2H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4aminofenazona (4-AF) y 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma un
compuesto rosáceo:
Ácido úrico + 2H2O + O2

Uricasa⎯⎯⎯ ⎯ → Alantoína + CO2 + 2H2O2
⎯
POD

2H2O2 + 4-AF + DCPS ⎯⎯ ⎯ → Quinonaimina + 4H2O
⎯
La intensidad de quinonaimina roja formada es proporcional a la
1,2
concentración de ácido úrico presente en la muestra ensayada .
SIGNIFICADO CLINICO
El ácido úrico y sus sales son el producto final del metabolismo de las
purinas. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención ensangre de urea, creatinina y ácido úrico.
Niveles altos de ácido úrico son indicativos de patología renal y
1,5,6
generalmente se asocia con la gota .
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los
datos clínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
R1
Tampón
R2
Enzimas
URIC ACID CAL

Fosfatos pH 7,4
2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS)

50 mmol/L
4 mmol/L
Uricasa
60 U/LPeroxidasa (POD)
660 U/L
Ascorbato oxidasa
200 U/L
4 - Aminofenazona (4-AF)
1 mmol/L
Patrón primario acuoso de Ácido úrico 6 mg/dL

PREPARACION
Reactivo de trabajo (RT):
Mezclar volúmenes iguales de R 1 Tampón y de R 2 Enzimas.
Estabilidad del reactivo de trabajo: 1 semana en nevera (2-8ºC) o 4
días a temperatura ambiente.
CONSERVACION Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit sonestables, hasta la fecha de
caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos
bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su
contaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
URIC ACID CAL
Una vez abierto, es estable 1 mes si se mantienen los viales bien
cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.
Indicadores de deterioro delos reactivos:
- Presencia de partículas y turbidez.
- Absorbancia (A) del Blanco a 520 nm ≥ 0,16.
MATERIAL ADICIONAL
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 520 nm.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio.
MUESTRAS
1
- Suero o plasma : Estabilidad 3-5 días a 2-8ºC y 6 meses a –20ºC.
1
- Orina (24 h) : Estabilidad 3 días a temperatura ambientea pH > 8.
Diluir la muestra al 1/50 en agua destilada. Mezclar. Multiplicar el
resultado obtenido por 50 (factor de dilución); Si la muestra es
turbia, calentarla a 60ºC 10 min. para disolver los precipitados de
urato y ácido úrico. No refrigerar.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . .520 nm (490-550)
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz
Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC / 15-25ºC
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
3. Pipetear en una cubeta:
RT (mL)
(Nota1-2)
Patrón
(µL)
Muestra (µL)
BSDT45

Ed.2004

Blanco
1,0
---

Patrón
1,0
25
--

Muestra
1,0
-25

Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC ó 10 min. 15-25ºC.
Leerla absorbancia (A) del Patrón y la muestra, frente al Blanco de
reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos.

CALCULOS
Suero o plasma

( A ) Muestra
x 6 (Conc. Patrón) = mg/dL de ácido úrico en la muestra
( A ) Patrón
Orina 24 h

( A ) Muestra
x 6 x vol. (dL) orina/24h = mg/24 h de ácido úrico
( A ) Patrón
Factor de conversión: mg/dL x 59,5= µmol/L.

CONTROL DE CALIDADEs conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar
el instrumento, los reactivos y el calibrador.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las...