Norma 092

NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-092-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODO PARA LA CUENTA DE BACTERIAS AEROBIAS EN PLACA.


Introducción

Esta técnica no pretende poner en evidencia todos los microorganismos presentes. La variedad de especies y tipos diferenciables por sus necesidades nutricionales, temperatura requerida para su crecimiento, oxígeno disponible, etc., hacen que el número decolonias contadas constituyan una estimación de la cifra realmente presente y la misma refleja si el manejo sanitario del producto ha sido el adecuado.

El recuento de termofílicos, psicrofílicos y psicotróficos es importante para predecir la estabilidad del producto bajo diferentes condiciones de almacenamiento.

Objetivo y campo de aplicación
Esta Norma Oficial Mexicana establece el método paraestimar la cantidad de microorganismos viables presentes en un alimento, agua potable y agua purificada, por la cuenta de colonias en un medio sólido, incubado aeróbicamente.
Fundamento
El fundamento de la técnica consiste en contar las colonias, que se desarrollan en el medio de elección después de un cierto tiempo y temperatura de incubación, presuponiendo que cada colonia proviene de unmicroorganismo de la muestra bajo estudio.
Definición
Unidades Formadoras de Colonias (UFC), término que debe utilizarse para reportar la cuenta de colonias en placa, las cuales pueden surgir de una célula o de un cúmulo de células.
Reactivos y materiales
• Reactivos
Medio de Cultivo.
Agar Triptona-Extracto de Levadura (agar para cuenta estándar).
FORMULA
INGREDIENTES CANTIDADES
• Extracto delevadura 2,5 g
• Triptona 5,0 g
• Dextrosa 1,0 g
• Agar 15,0 g
• Agua 1,0 l
Preparación del medio de cultivo.
• Suspender los componentes del medio deshidratado en un litro de agua. Hervir hasta total disolución.
• Distribuir en recipientes de vidrio esterilizables de capacidad no mayor de 500 ml, cantidades de aproximadamente la mitad del volumen del mismo. Esterilizar en autoclave a 121 ±1,0 ºC, durante 15 minutos. El pH final del medio debe ser 7,0 ± 0,2 a 25ºC.
Si el medio de cultivo es utilizado inmediatamente, enfriar a 45ºC ± 1,0 ºC en baño de agua y mantenerlo a esta temperatura hasta antes de su uso. El medio no debe de fundirse más de una vez.
 Materiales
Todo el material que tenga contacto con las muestras o los microorganismos debe estar estéril.
Se requiere, losmateriales mencionados en la NOM-110-SSA1-1994, Preparación y Dilución de Muestras de Alimentos para su Análisis Microbiológico.
Aparatos e instrumentos
Se requiere, además de los mencionados en la NOM-110-SSA1-1994, Preparación y Dilución de Muestras de Alimentos para su Análisis Microbiológico, los siguientes:
• Incubadora con termostato que evite variaciones mayores de ± 1,0ºC, provista contermómetro calibrado.
• Contador de colonias de campo obscuro, con luz adecuada, placa de cristal cuadriculada y lente amplificador.
• Registrador mecánico o electrónico.
• Microscopio óptico.
• Baño de agua con o sin circulación mecánica, provista con termómetro calibrado con divisiones de hasta 1,0 øC y que mantenga la temperatura a 45 ± 1,0 øC.
Preparación de la muestra
Para la preparaciónde la muestra seguir la NOM-110-SSA1-1994, Preparación y Dilución de Muestras de Alimentos para su Análisis Microbiológico.
Procedimiento
• Distribuir las cajas estériles en la mesa de trabajo de manera que la inoculación; la adición de medio de cultivo y homogenización, se puedan realizar cómoda y libremente. Marcar las cajas en sus tapas con los datos pertinentes previamente a su inoculación ycorrer por duplicado.
• Después de inocular las diluciones de las muestras preparadas según la NOM-110-SSA1-1994 mezclarlo mediante 6 movimientos de derecha a izquierda, 6 en el sentido de las manecillas del reloj, 6 en sentido contrario y 6 de atrás a adelante, hasta lograr una completa incorporación del inoculo en el medio. Dejar solidificar.
• Incluir una caja sin inóculo por cada lote de...