Normas

NMX-F-068-S-1980. ALIMENTOS. DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS.
En la elaboración de esta Norma participaron las siguientes Instituciones:
Subsecretaría de Salubridad.
Dirección General de Laboratorios de Salud Pública.

1. OBJETIVO Y APLICACIÓN

Esta Norma Mexicana establece el procedimiento para determinar proteínas en
Productos alimenticios.
2. REFERENCIA
Esta Norma se complementa con lasiguiente Norma Mexicana vigente:
NMX-BB-014. Utensilios de vidrio usados en laboratorio - Clasificación y tamaños
Nominales.
3. FUNDAMENTO
Este método se basa en la descomposición de los compuestos de nitrógeno orgánico por ebullición con ácido sulfúrico. El hidrógeno y el carbón de la materia orgánica se oxidan para formar agua y bióxido de carbono. El ácido sulfúrico se transforma en SO2,el cual reduce el material nitrogenado a sulfato de amonio.
El amoniaco se libera después de la adición de hidróxido de sodio y se destila recibiéndose en una disolución al 2% de ácido bórico. Se titula el nitrógeno amoniacal con una disolución valorada de ácido, cuya normalidad depende de la cantidad de nitrógeno que contenga la muestra. En este método de Kjeldahl-Gunning se usa el sulfato decobre como catalizador y el sulfato de sodio para aumentar la temperatura de la mezcla y acelerar la digestión.
4. MATERIALES Y REACTIVOS
El equipo de vidrio empleado debe cumplir con los requisitos que establece la
NMX-BB-014.
· Matraces Kjeldahl de 500 y/o 800 cm3
· Material común de laboratorio

4.2 Reactivos
· Ácido sulfúrico concentrado
· Sulfato de cobre pentahidratado
· Zincgranulado
· Hidróxido de sodio: Disolver con 500 cm3 de agua 500 g de hidróxido de sodio.
· Sulfato de sodio anhidro
· Ácido bórico al 2%
· Solución de ácido clorhídrico 0.1 N
· Indicador Shiro Tashiro: Disolver 0.2 g de rojo de metilo en 60 cm3 de alcohol y
Aforar a 100 cm3 con agua. Disolver 0.2 g de azul de metileno y aforarlos a 100 cm3 con agua. Mezclar 2 partes de rojo de metilo yuna de azul de metileno.

5. APARATOS E INSTRUMENTOS
· Digestor y destilador Kjeldahl
· Balanza analítica con ± 0.1 mg de sensibilidad
6. PROCEDIMIENTO
6.1 Determinar la masa, en la balanza analítica, de aproximadamente un gramo de muestra y pasarla cuantitativamente a un matraz Kjeldahl, añadirle 2 g de sulfato de cobre, 10 g de sulfato de sodio anhidro, 25 cm3 de ácido sulfúrico y unasperlas de vidrio.
6.2 Colocar el matraz en el digestor y calentar cuidadosamente a baja temperatura hasta que todo el material esté carbonizado, aumentar gradualmente la temperatura hasta que la disolución esté completamente clara y dejar por 30 minutos más a esa temperatura.
6.3 Enfriar y añadir de 400 a 450 cm3 de agua para disolver completamente la muestra, agregar 3 ó 4 gránulos de zinc, unpoco de parafina cuando sea necesario y 50 cm3 de hidróxido de sodio 1:1.
6.4 Inmediatamente conectar el matraz a un sistema de destilación, el cual previamente se le ha colocado en la salida del refrigerante un matraz Erlenmeyer de 500 cm3 que contenga 50 cm3 de ácido bórico y unas gotas del reactivo Shiro Tashiro como indicador.
6.5 Destilar hasta que haya pasado todo el amoniaco, que unas gotasde destilado no den alcalinidad con el papel tornasol, aproximadamente 300 cm3.
NOTA: Las primeras gotas de destilado deben hacer virar el color del indicador de violeta a verde.
6.6 Retirar el matraz recibidor y titular el destilado con ácido clorhídrico 0.1 N.
7. EXPRESIÓN DE RESULTADOS
El Nitrógeno presente en la muestra, expresado en por ciento se calcula mediante la siguiente fórmula:
Vx N x 0.014 x 100
% de nitrógeno = ¾¾¾¾¾¾¾¾¾¾ m
En donde:
V = Volumen de ácido clorhídrico empleado en la titulación, en cm3
N = Normalidad del ácido clorhídrico.
m = Masa de la muestra en g.
0.014 = Miliequivalente del nitrógeno.
El por ciento de proteínas se obtiene multiplicando el por ciento de nitrógeno obtenido por el factor correspondiente (Véase A.2).
APÉNDICE A
A.1 El...