Northern Blot Southern blot western blot

2. ¿Que es el Northern Blot?
El Northern Blot es una técnica utilizada en los laboratorios que se utiliza para detectar una secuencia de ARN específica en una muestra de sangre o de tejido.
2.1 Procedimientos
El procedimiento general comienza con la extracción del ARN total de una muestra de un tejido.
Los sistemas de capilaridad iónica que se utilizan para laextracción del ARN total de un gel de electroforesis a una membrana de Northern Blot.
Entonces las muestras de ARN son separadas por electroforesis en gel, así mismo la electroforesis en gel es un grupo de técnicas empleadas por los científicos para separar moléculas basándose en propiedades como el tamaño, la forma o el punto isoeléctrico.
Por consiguiente después del marcaje de lasonda, esta se hibrida con el ARN de la membrana.
Dada la fragilidad de los geles y la incapacidad de la sonda para penetrar en la matriz, entonces las muestras de ARN, separadas cada una por tamaño mediante la electroforesis en gel conceptualizada anteriormente, entonces se afirma que serán transferidas a una membrana de Nailon por medio de capilaridad o un sistema de transferencia alvacío.
Para finalizar, la membrana debe higienizarse para asegurar que la sonda se ha unido de forma específica y para evitar ruido de fondo en las señales emitidas por la misma.

2.2 Aplicaciones y usos
Entre las aplicaciones más importantes del Northern Blot se puede destacar:
El Northern Blot permite observar un patrón en específico de expresión genética entre tejidos,órganos, estadios del desarrollo, niveles de estrés ambiental, infecciones causadas por patógenos y durante el curso del tratamiento del mismo.
Los patrones de expresión obtenidos nos ayudan a conocer las funciones específicas de los genes, desde que el ARN se separa por su tamaño, entonces las sondas nos pueden dar una idea de su tamaño.
Esta técnica se ha utilizado para productode un gen que puede además mostrar la sobreexpresión de indicarnos delecciones o errores en el oncogenes y la desregulación de proceso de transcripción, genes supresores tumorales en células cancerosas cuando son comparados con tejidos normales.
La variación en el producto de un gen nos puede mostrar errores en la transcripción,
3. ¿Que es el Southern Blot?
Según Passarge etal. (2007) el Southern Blot hace referencia a un método sensible de detección de uno o más fragmentos específicos de ADN dentro de una mezcla de fragmentos de ADN compleja y aleatoria. Southern significa sureño en inglés.
3.1 Procedimientos
Según Passarge et al. (2007) afirma que los procedimientos para el Southern Blot son los siguientes:
Se extrae el ADN total de losleucocitos u otras células. El ADN se aísla y se corta con una enzima de restricción. Los fragmentos se ordenan por tamaño en un gel (por lo general de agarosa) en un campo eléctrico (electroforesis). Los fragmentos más pequeños migran más rápido del cátodo al ánodo; los fragmentos más grandes, migran más lento. Luego se realiza la impronta (blot): los fragmentos contenidos en el gel se transfieren a unamembrana de nitrocelulosa o de nailon. Allí el ADN se desnaturaliza con un álcali y se fija a la membrana mediante un calentamiento moderado o por ligamento cruzado con UV. La muestra se incuba con una sonda de ADN de cadena simple. Esta banda, así identificada, se toma del gel original en la posición correspondiente y es procesada para futuros análisis.
3.2 Aplicaciones
SegúnPassarge et al. (2007) las aplicaciones más importantes en la medicina sobre el Southern Blot se destacan: En el diagnóstico y caracterización de diversas inmunodeficiencias, en la distrofia muscular de Duchenne, en la hipoplasia adrenal congénita la deficiencia de glicerol-quinasa.
4. ¿Qué es Western Blot?
Según Gutierrez (2006) afirma que el Western Blot, también llamado inmunoblot, es...