Numero Mas Probable

PRÁCTICA No. 7 DETERMINACIÓN DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES EN AGUA RESIDUAL POR EL MÉTODO DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP)

I.

OBJETIVO

Determinar la presencia de coliformes totales y fecales en el efluente de la PTAR de la UPEMOR por el método del Número Más Probable, utilizando la técnica de tubos de fermentación múltiple. II. INTRODUCCION

Debido a que las aguas residuales son decomposición variada provenientes de descargas de usos municipales, industriales, comerciales, de servicios, agrícolas, pecuarios, domésticos, incluyendo fraccionamientos y en general de cualquier uso, así como la mezcla de ellas, contienen diferentes tipos de microorganismos contaminantes y las diferentes concentraciones, dependiendo de su fuente. La variada población de microorganismos en esta agua,proviene del suelo y de origen intestinal, incluyen aerobios y anaerobios estrictos y facultativos así como también numerosos virus como: Poliovirus y virus de la hepatitis. Igualmente pueden contener formas parasitarias variables como quistes de Protozoarios y huevecillos de Helmintos (Metazoarios).

Asimismo, existe en nuestro país el grave problema de contaminación de ríos, lagos acuíferos ycostas debido a que estos son utilizados como depósito de todos los desechos generados por las actividades humanas. Estos microorganismos pueden sobrevivir al tratamiento, por lo que su reúso p.ej., en riego agrícola, actividades recreativas: Aguas de piscinas, baños de hidromasaje, aguas potables naturales, actividades piscícolas y aguas marinas superficiales (playas), representan un riesgopotencial a la salud pública.

La presencia y extensión de contaminación fecal es un factor importante en la determinación de la calidad de un cuerpo de agua. Las heces contienen una

variedad de microorganismos y formas de resistencia de los mismos, involucrando organismos patógenos, los cuales son un riesgo para la salud pública al estar en contacto con el ser humano. El examen de muestras deagua para determinar la presencia de microorganismos del grupo coliforme que habitan normalmente en el intestino humano y de otros animales de sangre caliente, da una indicación, pues dada la limitada capacidad de algunos miembros del grupo de organismos coliformes para sobrevivir en agua; sus números también pueden emplearse para estimar el grado de contaminación fecal. Son Organismos coliformesaquellos capaces de crecimiento aeróbico ya sea 35 ó 37 ± 1°C en un medio de cultivo líquido lactosado con producción de acido y gas dentro de un periodo de 48 h. El método de la NPM es un método robusto por lo que puede aplicarse en cualquier tipo de agua, aún aquellos que contienen gran cantidad de materia orgánica. Para la determinación del NMP de Coliformes Totales y Fecales en este tipo deaguas, es necesario proceder a preparar diluciones decimales de la muestra, debido a que se espera que la concentración de coliformes sea superior en éstas que en un agua potable. El número de diluciones varía mucho, dependiendo del origen de la muestra a tratar. Por lo demás, para su análisis de procede en la misma forma que para una muestra de agua potable. III. MATERIAL Y SUBSTANCIAS

Muestrade agua de del efluente de la PTAR de la UPEMOR. Mechero Bunsen. Cerillos ó encendedor. 9 tubos de 18 x 150 mm conteniendo 9 mL de agua de dilución estéril. 9 Pipetas de 1 mL estériles. 15 tubos de 18 x 150 mm con campana Durham, conteniendo caldo lactosado estéril de concentración sencilla. 15 tubos de 18 x 150 mm con campana Durham, conteniendo Caldo Lactosa Bilis VerdeBrillante estéril. 10 tubos de 18 x 150 mm con campana Durham, conteniendo caldo E.C. estéril. 2 Cajas de Petri conteniendo Agar Endo estéril. 5 Tubos de 18 x 150 mm conteniendo agar nutritivo inclinado estéril. Agitador de tubos Vortex. Gradillas para tubos de 18 x 150 y de 13 x 100 mm.

Asa Bacteriológica. Incubadora a 35 °C. Baño Incubador para Coliformes fecales a una...