obra

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ESTERILIZACIÓN
Es un procedimiento que engloba un término absoluto que significa la total
destrucción o remoción de toda forma de vida.
Para medios de cultivo se usan altas temperaturas, vapor saturado a presión,
algunos agentes químicos ( muy pocos ) y ciertos filtros y radiaciones U.V.
Se dividen en métodos 1) Físicos
2) Químicos.
1) Calor y filtros esterilizantes (Medios deCultivo)
Calor: la muerte térmica de un microorganismo es el resultado de la
inactivación de proteínas celulares esenciales o enzimas y hay alta correlación
entre altas temperaturas y la inactivación celular o proteica.
En 1881 se hablaba de la diferencia que había en el uso de calor seco y
húmedo como mecanismo de destrucción de microorganismos.
Las condiciones y mecanismos por las que actuaban noeran las mismas.
Se hablaba de un mecanismo de oxidación por calor seco además de efectos
tóxicos por elevada concentración de electrolitos y mecanismos de coagulación
y desnaturalización de proteínas y alteración funcional de la membrana celular
por calor húmedo.
En calor seco hay más alta estabilidad proteica que con calor húmedo por ej.
E.coli se deseca y es más resistente al calor.
Laalbúmina de huevo con 50% de agua coagula a 56ºC
albúmina con el 25% de agua, coagula entre 74 y 80ºC, con 6% a 145ºC
Sin agua coagula entre 160-170ºC.
Pretch y Hansen demostraron que cuando se calienta una proteína con agua,
hay ruptura de esta en las uniones disulfuro formando cadenas peptídicas
móviles o activas que se reactivan formando nuevas proteínas
(
desnaturalización ) cuandomenos agua tenga la proteína, hace falta mas
energía para romper la molécula. Se necesita más temperatura en calor seco
que con calor húmedo. En un medio de cultivo simple influye el contenido
proteico, grasas, sales y componentes mas groseros ( como carne, hígado, etc
) que pueden revestir a las bacterias, e impedir la llegada del calor a ellas.
La presencia de sales aumenta la resistencia alcalor, el Mg, Fe y Ca aumenta
la resistencia de las esporas en algunas bacterias como por ej. Cl. botulinum,
esto es debido a que el Ca puede ligar varios grupos de cadenas peptídicas
haciéndolas más resistentes a la desnaturalización.
Calor Húmedo:
- Ebullición.
- Vapor fluente – Tyndalización 80-100ºC 3 días.
- Vapor a presión – autoclave ( la totalidad del material a esterilizar debe estaren contacto con el vapor ).

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Calor seco:
- Llama directa ( mechero )
- Incineración ( residuos )
- Aire caliente ( hornos )
Con calor seco se requieren temperaturas más altas y mayor tiempo, se usa
para material de vidrio, aceites, gelatinas, polvos que son impermeables al
vapor.
Calor tiempos mínimos de esterilización
CALOR HÚMEDO
TEMP.- TIEMPO (EN MINUTOS) PRESIÓN
121ºC
1515
126ºC
10
20
134ºC
3
30
140ºC
150ºC
160ºC
170ºC
-

CALOR SECO
TIEMPO (EN MINUTOS)
180
150
120
60

El calor húmedo es el preferido porque su acción letal es más rápida por ej. a
80ºC 5 a 10 minutos se destruyen las formas vegetativas de bacterias y hongos.
Para esporas de Cl.botulinium 121ºC 4 minutos, Bacilus estearothermophilus
121ºC 12 minutos.
Se utiliza para medios decultivo en producción de vacunas.
Calor sensible: cantidad de calor necesario para llevar 1 Lt. de agua a ebullición
( 80 calorías ).
Calor latente: para llevar un Lt. de agua hirviendo a vapor necesitamos 540
calorías ( casi 7 veces más ).
Cuando el vapor condensa cede 540 calorías.
DIAGRAMA DE FASE
ºC
135
130
125
120
115
110
105
100

VAPOR

La linea indica el equilibrio delas dos fases.
(agua y vapor) Hay tanta agua que pasa a
vapor, como vapor que vuelve a agua.
El vapor esta sobresaturado de agua

AGUA
5

10

15

20

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PRESION EN LIBRAS

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En forma práctica se puede calcular la temperatura en relación con la presión
en libras, sumando 106 a la presión en libras.
Por ejemplo: 106+15= 121ºC.
Si le saco agua del sistema y aumento la...