Obtención de glucógeno a partir de hígado de rata y su caracterización química y cromatográfica

Introducción
El glucógeno es un polímero complejo de glucosa que se detecta en el hígado y músculo, es sintetizado por una ruta bioquímica y degradado por una ruta metabólica. Normalmente laglucosa es fosforilada a glucosa-6-fosfato para convertirse a continuación en glucosa-1-fosfato. Después de su interacción con trifosfato de uridina (UTP) para formar UDP-glucosa, este nucleótido de uridinacede moléculas de glucosa y reacciona con pequeños iniciadores de glucógeno para ir progresando progresivamente unidades cada vez mayores. Al objeto de poder formar la estructura típica en formaarborizada de glucógeno es necesaria una enzima ramificadora. En la degradación del glucógeno participa la enzima fosforilasa. Tanto en el músculo como en el hígado esta enzima es capaz de degradar lascadenas rectas del glucógeno, pero no puede avanzar más allá de un punto de ramificación. Para poder hidrolizar este enlace se precisa la participación de otra enzima específica, que se conoce comoenzima desramificadora. En este caso el producto liberado es glucosa-1-fosfato.

Objetivo
Se realizará el aislamiento y purificación del glucógeno a partir del hígado de un organismo vivo y seidentificará la composición de los productos por medio de hidrólisis ácida y enzimática por medio de reacciones químicas características.

Diagrama de flujo del procedimiento de obtención de glucógeno1era Sesión




Cálculos
Teóricos
19g-------------100%
1.33 g-------------7%


Prácticos
19 g-----------100%
0.7819-------------4.11%

Tabla de Resultados
Ácida TestigoEnzimática Blanco
1N 2N 4N Glucógeno sin hidrolizar Conc. 1:2
Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6 Agua
Fehling +
Precipitado rojo + Precipitado rojo + Precipitado rojo - +
Precipitado rojo +Precipitado rojo -
Lugol -
Color Amarillo -
Color Amarillo -
Color Amarillo + -
Naranja -
Amarillo -
Amarillo
Seliwanoff Ligeramente amarillo Ligeramente amarillo Color Durazno - - - -...