Obtencion del adn

colegio de bachilleres del estado de oaxaca |
Obtención del ADN |
Práctica de laboratorio I |
|
Biologia II |

Alumno: René Egremy Valdez
Profesor: Edgardo Aragón Hernández

OBJETIVO
EXTRAER EL ADN A PARTIR DEL ROMPIMIENTO Y LA SEPARACIÓN DE LAS ESTRUCTURAS QUE LO ENVUELVEN Y PROTEGEN EN LAS CÉLULAS VEGETALES.
INFORMACIÓN PREVIA
CARARACTERÍSTICAS DEL ADN
Las células eucariontesposeen una estructura subcelular redondeada denominada núcleo, donde se aloja el material genético o ADN. Este ADN se encuentra asociado a proteínas básicas llamadas histonas, con las que forman la cromatina, que se encuentra condensada en el núcleo.
Existen regiones de la cromatina que siempre están condensadas (heterocromatina), estas son zonas altamente activas y se ubican en la membrananuclear.
Las otras regiones de la cromatina que pueden condensarse se denominan eurocromatina.
La cromatina debe condensarse 10 veces más para poder formarse los cromosomas. Al formarse, el ADN tiene un grado de compactación de 10.080 veces.
El ADN esta formado por una base nitrogenada, un grupo fosfato y una pentosa. Entre sus bases nitrogenadas, solo existe la adenina, la guanina, citosina y latimina.

PROTEINAS QUE SE ENCUENTRAN EN EL ADN
Las proteínas asociadas al ADN se conocen colectivamente con el nombre de histonas. Son policepticos relativamente cortos cargados positivamente básicos y por lo tanto son atraídos por las cargas negativas de ADN (acido).
Las histonas son sintetizadas en cantidad durante la fase s (s por síntesis) del ciclo celular. Una de las funciones de esasproteínas esta relacionada con el empaquetamiento del ADN en la forma del cromosoma. Los dos metros de ADN en la forma célula humana son empaquetados en 46 cromosomas de un largo combinado de aproximadamente 200 ml.
La célula tiene unos 90 millones de moléculas de histonas siendo la mayoría perteneciente a un tipo conocido H1. Se conocen cinco tipos de las siguientes histonas: (H1, H2A, H2B, H3 YH4 moléculas en total), con la excepción de la H1 la mayor parte de las histonas de las eucariontes son muy similares.

MATERIAL Y EQUIPO:
1 Microscopio óptico compuesto.
1 Licuadora.
1 Colador.
1 Vaso de precipitados de 250 ml.
1 Probeta.
1 Pipeta de 10 ml.
1 Varilla de vidrio.
2 Tubos de ensayo.
2 Portaobjetos.
2 Cubreobjetos.

REACTIVOS Y EJEMPLARES BIOLÓGICOS.
200 gr. Demuestra vegetal (media taza de chicharos verdes secos).
70 ml. De detergente para trastes.
0.05 gr. De ablandador de carne.
7 ml. De alcohol etílico o isopropilico al 70-95 %.
1.5 gr de Cloruro de sodio.
2 gotas de Azul metileno.
5 gr. Bicarbonato de Sodio.

OBTENCIÓN DE ADN.
¿Para que se utiliza el ablandador de carnes?
R= El ablandador de carnes contiene enzimas que específicamente seconocen como enzimas proteolíticas, se trata de un grupo de enzimas que pueden romper algunos enlaces entre aminoácidos, de esta forma permite que el ADN se extraiga por así decirlo.
¿Para que se utiliza el jabón liquido en la obtención de ADN?
R= Porque al combinarse las partes del jabón, quedan muy similares una de otra lo que permite poder observarlas
INTRODUCCIÓN.
La extracción del ADN de unamuestra vegetal, se basa en el hecho de que, los iones salinos, son atraídos hacia las cargas negativas de ADN, permitiendo la disolución y posterior extracción de la célula. Se empieza por lisar las células mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En este momento el tampón contiene el ADN y todo un surtido de restosmoleculares asociados como ARN, carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN son de gran longitud, se abren fraccionándose en cadenas más pequeñas y son separados por la acción del detergente. Solo queda por extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza el alcohol isopropilico, que atraerá el ADN del cual se tomara con...