OBTENCION E IDENTIFICACION DE METABOLITOS SECUNDARIOS

OBTENCION E IDENTIFICACION DE METABOLITOS SECUNDARIOS
Objetivos:
Realizar pruebas de identificación al producto natural para reconocer los metabolitos secundarios presentes en el.
Aislar elflavonoide (apigenina) encontrado en un producto natural (flores de la manzanilla) por medio de procesos de extracción simple (maceración).
Realizar pruebas de identidad al compuesto obtenido paraverificar que es el esperado.


PRUEBAS COLORIMÉTRICAS PARA IDENTIFICACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS

ALCALOIDES

1. Tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco (o seco en polvo)
2.Macerar en un mortero, después pasar la muestra a un vaso de precipitados y adicionar HCl al 5% de modo que quede cubierta.
3. Calentar a baño maría durante 10 min, enfriar y filtrar.
4. Colocar en dostubos de ensaye 0.5 mL del filtrado ácido, a uno de ellos adicionar dos gotas de reactivo de Mayer y al otro dos gotas de reactivo de Dragendorff y rotular.
Interpretación: Si se observa turbidez oprecipitado en los dos tubos se considera positiva.

ESTEROIDES Y/O TRITERPENOIDES

1. En un vaso de precipitados limpio y seco, colocar una pequeña cantidad de la muestra seca y molida, y adicionardi-clorometano suficiente para cubrir la muestra (realizar en campana de extracción), agitar con una varilla de vidrio y filtrar sobre sulfato de sodio anhidro.
2. En un tubo de ensaye tomar 1 mL delfiltrado orgánico y agregar por la pared del tubo 1 mL de anhídrido acético.
3. Agregar dos gotas de H2SO4 concentrado.
Interpretación: la aparición de coloraciones verdes, azules, rojas ovioletas indica que la muestra es positiva para esteroides y/ triterpenoides.


SAPONINAS

1. Tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco y macerar en un mortero con una cantidad suficientede agua para cubrir la muestra.
2. Filtrar a través de gasa. Colocar 4 mL del filtrado en un tubo de ensaye y agitar vigorosamente durante 1 min.
Interpretación: si después de la agitación se forma...