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Extracción de ADN

Objetivos
1. Comprender la base de las técnicas de extracción de ADN
2. Extraer y manipular el ADN de células vegetales

Materiales
• Fresas
• Buffer de Extracción:solución de detergente/sal (20mL de jabón líquido al 10%, 20g de sal de cocina y 180 mL de agua destilada)
• Bolsas Ziploc
• Embudo
• Gasa o filtros de café
• Beakers pequeños
• Tubos de ensayo
• Jugode papaya o piña, o suavizante de carne OPCIONAL
• Etanol al 95% BIEN FRÍO (ideal: del congelador)
• Palillos de plástico para revolver el café

Fundamento teórico
Existen diversos procedimientospara extraer ADN de las células. Estos varían en la cantidad y pureza del ADN que se obtiene al finalizar el procedimiento, pero la base de todos ellos es muy similar.
La extracción de ADN requiereuna serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrananuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.
La solución con detergente y sal es capazde romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear.
Los jugos de piña y papaya contienen un enzima, la papaína, que contribuye a eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN.
Elalcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua.
Cuando el ADN va autilizarse en el laboratorio para otras aplicaciones, se toman estas fibras que precipitan en la interfase y se disuelven en agua o en un amortiguador apropiado. Esta solución de ADN se puede mantener a 4°C(en un refrigerador) por años, puesto que es una molécula muy estable.

Procedimiento
1. Introduzca 2 fresas en una bolsa Ziploc, intente sacar el aire antes de cerrar.
2. Aplaste las fresas por...