Organica

Simón Pérez Jeanette Areli
González Martínez Luis Daniel
2QM1
Sección: 1
Práctica No. 6 “HIDRÓLISIS DE UNA PTOTEÍNA Y ENSAYOS PARA PROTEÍNAS Y AMINOÁCIDOS”

OBJETIVO:
* Efectuar la hidrólisis total de una proteína.
* Identificar algunos aminoácidos presentes en un hidrolizado de proteína, por medio de sus propiedades físico-químicas.
* Identificar por medio de cromatografíaen placa fina algunos aminoáidos presentes en un hidrolizado de proteína.

Resultados:
Hidrólisis de grenetina (Solución A):
Para esta solución, agregamos 1 g de grenetina, 10 mL de agua destilada y 10 mL de ácido clorhídrico concentrado en un matraz balón de fondo plano, teniendo cuidado a la hora de adicionar el acido, ya que es muy corrosivo. Después, adaptamos un refrigerante en posiciónde reflujo y calentamos la mezcla del matraz por 35 minutos exactos; en este paso ocurrió la hidrólisis de la grenetina para generar α-aminoácidos derivados de esta proteína. Dejamos enfriar y el profesor adicionó un poco de carbón activado para eliminar ciertas impurezas coloridas que pudiera contener el producto y se calentó 2 minutos. Por último filtramos para separar el carbón activado ytenemos la solución con aminoácidos en un vaso de precipitados.
Solución de grenetina sin hidrolizar (Solución B):
Se tomaron 5 mL de la solución A y se adicionó hidróxido de sodio al 10% hasta neutralizarlo. Se tenía un estimado era de 10 a 12 mL de la base, sin embargo nos pasamos al adicionar el hidróxido de sodio y el papel pH se tornó verde amarillento, cuando debía quedar amarillo que indica unpH de 7 (neutro). Optamos por usar solución B de otros compañeros como la profesora propuso. Esta solución B fue utilizada en tres reacciones que escribimos más adelante.
Solución de grenetina sin hidrolizar (Solución C):
Esta solución simplemente consta de una mezcla entre 0.5 g de grenetina y 20 mL de agua destilada en un vaso de precipitados. En esta solución no hay aminoácidos hidrolizados.Solución de albúmina:
Agitamos clara de huevo por 10 segundos, adicionamos 100 ml de agua y filtramos en un pedazo de manta de cielo y el resultado del filtrado fue el que utilizamos como Solución D.
Reacción de Xantoproteica.

En dos tubos de ensayo se agrega en uno solución de grenetina hidrolizada y en otro la albúmina, después le adicionamos HNO3 y luego calentamos en baño María.Posteriormente agregamos NaOH al 10% En el primer tubo estba la grenetina hidrolizada y aparece un precipitado amarillo claro existeanillo bencénicos. En el segundo tubo esta la albúmina y aparece abundante precipitadoamarillento lo cual nos indica que hay anillos bencénicos.

Reacción de Precipitación.

Enumeramos tres tubos de ensaye y a cada uno adicionamos:
Tubo nº 1: 2ml de grenetinahidrolizada.
Tubo nº 2: 2 ml de solución de albúmina.
Tubo nº 3: 2 ml de agua destilada.

A cada tubo adicionamos 5ml de solución de NaOH al 10% y 1.0 ml de solución de acetato de plomo al 10%, calentamos a ebullición durante 5 minutos y observamos.

Se pudo observar que todas las muestras se coagularon, debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que puedenprecipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.

Reacción de Biuret.Enumeramos 6 tubos de ensayo, en cada tubo colocamos lo siguiente
Tubo nº 1 : 0.5 ml de agua destilada y 0.5ml de solución de NaOH al 10%.
Tubo nº 2 : 0.5ml de grenetina sin hidrolizar y 0.5ml de solución de NaOH al 10%.
Tubo nº 3 : 0.5 ml de solución de albúmina.
Tubo nº 4 : 0.5ml de grenetina hidrolizada sin neutralizar y 0.5ml de solución de NaOH al 10%.
Tubo nº 5 : 0.5ml de albúmina y...