organizacion subcelular





TRABAJO PRÁCTICO N° 5

“ORGANIZACIÓN SUBCELULAR”





Alumnos: - María Alejandra Allende
- Danitza Crispin- Sara Montecinos
- Alondra Verdugo

Sección: 007Profesores: - María José Díaz, Miguel López


INTRODUCCIÓN
Las células han sido descubiertas y analizadas gracias al microscopio, es por esto que conocemos dos grandes clasificaciones de células: las procariontes y los eucariontes, ambas se diferencian entre sí por el tamaño, y principalmente por las estructuras queposeen. Las células eucariontes, en general, son más grandes y mas complejas que las bacterias y Archea[1]. A su vez, estas se dividen en células animales y células vegetales, según las estructuras que contienen. Estas estructuras son principalmente los organelos celulares, donde cada uno tiene una función específica dentro de la célula, estos son: nucleo (organelo más grande de la célula ycontiene la información genética), retículo endoplasmático rugoso (participa en la síntesis y el transporte de proteínas), retículo endoplasmático liso (participa en la síntesis de lípidos y transporte celular), aparato de golgi ( madura y especializa las proteínas), ribosomas (sintetizan proteínas del citoplasma), peroxisomas (encargado de la detoxificación de la célula), lisosomas (contienen enzimashidroliticas y se encargan de la digestión celular), mitocondrias (encargada de la respiración celular y síntesis de ATP) y cloroplastos (encargados de la fotosíntesis en células vegetales).
Es importante saber donde se encuentra cada uno de estos organelos y saber su función, ya que nos ayuda a comprender la estructura de las células. Para esto, se utilizan ciertas técnicas tales como elfraccionamiento subcelular, este método consiste en la separación de los organelos de la célula, según su tamaño y densidad. Para lograr esta separación, se lleva a cabo la ruptura del tejido utilizando diferentes técnicas, entre ellas la sonicacion o trituración (en esta etapa se rompen las membranas, pero los organelos quedan intactos).
La muestra, luego de estar homogenizada, se lleva a unproceso de centrifugación, esto se hará repetidas veces dependiendo del tamaño del organelo que se desea obtener, El resultado de la centrifugación será una porción de pellet (porción de mayor densidad), y sobrenadante (donde se encuentran los organelos mas pequeños). Este proceso se ejecuta las veces que sea necesario para obtener una porción con los organelos buscados.
También hay otras técnicaspara separar organelos, como utilizar proteínas reconocedoras, esto consiste en buscar una proteína especifica de un organelo para su reconocimiento, el ejemplo por excelencia es el ADN y el núcleo.





OBJETIVOS
Objetivo General:
- Comprender y reconocer las técnicas de homogenización, centrifugación y moléculas marcadoras utilizadas en el fraccionamiento subcelular.

METODOS YMATERIALES.
Experimento N°1 :
Se utilizo una muestra de hígado homogeneizado y se introdujo en un tubo de Falcón, esté se depositó en el refrigerante a 4°C por 5 minutos, luego de alcanzar la temperatura deseada, se ubicó la muestra en la centrifuga a 2.500 Rpm durante 10 minutos, posteriormente se extrae el sobrenadante con una pipeta y se deposita en un nuevo tubo de falcón, el cual se depositó...