organizacion subcelular



Universidad Andrés Bello
Facultad de Ciencias de la Salud
Departamento de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Biología Celular BIO 035






Trabajo Práctico N° 5:
Organización Subcelular






















Introducción
La célula es la unidad básica compatible con la vida, de ella podemos clasificarla como procariontes y eucariontes, no obstanteesta terminología a grandes rasgos no son suficientes para comprender su estructura, organización y funcionamiento. Hace 300 años aproximadamente mediante un microscopio fue observado y definido por primara vez la terminología “célula” al observar las celdillas de un corcho, luego con el paso de los años y junto con la modernización del microscopio se empezó a visualizar componentes subcélularesllamados orgánelos (estructuras que se encuentran en el interior de la célula delimitada por una o dos membranas). Actualmente se conocen el núcleo, presente de forma definida con una membrana solo en células eucariontes encargado contener el material genético; Mitocondrias formados por una doble membrana, su función es generar energía; Retículo endoplasmaticos son una red de tubos o sacosaplanados que se encuentra pegado al núcleo su función varía dependiendo de la asociación a ribosomas (RER) este complejo es el encargado a la síntesis de proteína y el REL que se encuentra más distal al núcleo es el encargado de la síntesis de lípidos; los Cloroplastos de encuentra formado por una doble membrana y está presente solo en células vegetales , su función es en la participación de lafotosíntesis ya que contiene clorofila; Ribosomas, formados por dos subunidades (una mayor y otra menor) que contienen proteínas asociadas a ARN, este organelo se puede encontrar en el RE o libres en el citoplasma (contenido principalmente por agua que se encuentra en el interior de la célula); el citoesqueleto es otro organelo que está formado por variados tipos de proteínas que polimerizan estructurasfilamentosas encargadas, según su tipo, en la rigidez, movimiento y división celular; aparato de golgi formado por membranas apiladas una sobre otras, es el encargado, principalmente, en la distribución de lípidos y proteínas que ya fueron sintetizadas en el RE; Lisosomas que son vesículas encargadas de la digestión celular y los peroxisomas, vesículas encargadas de la detoxificación celular.
Paraobtener este tipo de clasificaciones se puede utilizar el “fraccionamiento celular” que básicamente consiste en visualizar o separar los componentes subcélulares (orgánelos) uno de los métodos utilizados es el centrifugado. Lo principal en este método es obtener una muestra que contenga células que serán procesadas para obtener en tubos que fueron sometidos a centrifugación y debido a lasdiferencias de tamaños y densidad de componentes a una cierta cantidad de RPM (revoluciones por minutos) se obtendrá un Pellet y un sobrenadante, en el pellet estarán los primeros orgánelos que debido a la fuerza de gravedad caerán al fondo y en el sobrenadante estarán aquellos que no “decantaron”, este sobrenadante se puede volver a someter a centrifugación para obtener otro pellet y otro sobrenadanteque posteriormente puede volver a ocuparse. ¿Pero bastará solo con este procedimiento para distinguir estos orgánelos?. A simple vista en un microscopio debido a su estructura puede no distinguirse un organelo de otro y para ello se utilizan marcadores que es un método que ocupa la tinción para mejorar los contrastes (color) de imagen en el microscopio que reacciona con alguna estructura celulardebido a su composición química, un ejemplo de ello es el azul de metileno que hace más visible el núcleo de las células.



Objetivos
Conocer e identificar las etapas de Fraccionamiento Subcelular.
Identificar organelos presentes en muestras de homogenización

Materiales y métodos

En un comienzo del práctico, la persona a cargo del laboratorio entrega un primer homogenizado que fue...