P2 Bioquimica FINAL

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MORELOS
Facultad de Farmacia

Laboratorio Modular de Bioquímica




OBJETIVO
Preparar diferentes soluciones amortiguadoras.
Calcular el pH de las soluciones amortiguadoras con la Ecuación de Henderson-Hasselbach y comparar el valor obtenido con el registrado por el potenciómetro.
Observar el comportamiento del pH de la solución amortiguadora durante suvaloración con un ácido y una base fuerte.



INTRODUCCIÓN
La célula es un sistema complejo perfectamente controlado. Cuando las células se agrupan y constituyen un órgano o tejido, es necesaria una acción concertada de todas ellas. Por lo que la célula debe poseer y mantener sistemas reguladores que coordinen la actividad de todos sus constituyentes. Por esta razón, debemos definir al sistema regulador,tampón ó solución amortiguadora, como una disolución cuyo objetivo es el control de pH dentro de una célula ya que las variaciones de protones son muy pequeñas aún cuando se adicionen cantidades importante de ácidos ó bases fuertes. Estas disoluciones necesitan dos componentes, uno que sea capaz de neutralizar ácidos, y otro que sea capaz de neutralizar bases.
Las soluciones reguladoras comunesestán constituidas por un acido débil y sus base conjugada, o por una base débil y su acido conjugado. Su funcionamiento es muy fácil de entender, ya que la base conjugada actúa como un deposito de protones cuando se añade un acido fuerte. De esta manera, la razón [base conjugada]/[acido] se mantiene aproximadamente constante y se produce un cambio mínimo en el pH. De forma similar sucede con elacido, ya que actúa como dador de protones cuando se añade una base fuerte, manteniendo la razón [base conjugada]/[acido] aproximadamente constante y minimizando el cambio de pH. Sin embargo si adicionáramos una base o un acido al agua, esta experimentaría un cambio brusco en el pH, debido a que ella carece de un sistema de amortiguamiento de pH.
Por lo tanto el pH de una solución amortiguadora dependeexclusivamente de la relación de concentraciones de la sal y del acido, y es independiente de la concentración absoluta de los mismos. Sin embargo, la capacidad de un tampón depende de la concentración de este.
Cambio de pH tras añadir ácido/base al agua
Cambio de pH tras añadir ácido/base a una disolución amortiguadora


MATERIALES Y REACTIVOS

Cantidad
Material
Cantidad
Reactivo




1
Pistilo70 gramos
Col morada
1
Espátula
150 ml
Etanol absoluto
1
Piceta
50 ml
Fosfato de sodio monobásico 0.1M
4
Matraz aforado de 50 ml
50 ml
Fosfato de sodio dibasico 0.1M
1
Mortero
50 ml
TRIS 0.1M
1
Agitador
50ml
HCl 0.1M
4
Vaso de precipitado 100 ml
50
Ácido Acético 0.1M
3
Vaso de precipitado 250 ml
50
Acetato de Sodio 0.1M
2
Vaso de Precipitado 50 ml
50
Hidróxido de Amonio 0.1M
1
Pipeta Pasteur50
Cloruro de Amonio 0.1M
1
Vaso de yogurt
100ml
NaOH 0.1M
1
Gasa
100ml
HCl 0.1M
1
Embudo


1
Parrilla


1
Potenciómetro


1
Balanza analítica


16
Tubos de ensayo


1
Gradilla




METODOLOGÍA

(1)DISEÑO DE SOLUCIONES AMORTIGUADORAS
a) Preparar 50 mL 0.1 M de las siguientes soluciones, para ello se repartirán por equipos según muestra la tabla.
Soluciones
Equipo
Fosfato de sodio monobásicohidratado (NaH2PO4 H2O)
Fosfato de sodio dibásico Na2HPO4
1
TRIS
Ácido clorhídrico HCl
2
Ácido acético CH3COOH
Acetato de sodio NaAcO
3
Hidróxido de amonio NH4OH
Cloruro de amonio NH4Cl
4

b) Una vez hechas las soluciones, se mezclan en un vaso de precipitado de 250 mL
c) Con la ecuación de Henderson-Hasselbach, se calcula el pH teórico de la solución
d) Tomar el pH de la solución con ayuda delpotenciómetro y comparar.
(2) PRUEBA DE CAPACIDAD DE AMORTIGUAMIENTO
I. De la mezcla amortiguadora resultante, dividirla en 50 mL y 50 mL.
II. Etiquetar una muestra como HCl y la otra como NaOH
III. S le adicionarán 5 gotas de la solución NaOH o HCl, según sea el caso, ambas al 0.1 N
IV. Tomar y registrar el resultado de pH que indique el potenciómetro.
V. Adicionar hasta completar 30 gotas, e ir...