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CAPÍTULO 1.1.4.

PRINCIPIOS DE VALIDACIÓN PARA LAS PRUEBAS
DE DIAGNÓSTICO DE LAS ENFERMEDADES
INFECCIOSAS

INTRODUCCIÓN
La validación consiste en la evaluación de un proceso a fin de determinar su idoneidad para un uso
particular e incluye la optimización de una prueba y la demostración de las características de su
realización. Un ensayo validado para una enfermedad infecciosa produceresultados que identifican
la presencia de un componente concreto que se ha de analizar (por ejemplo, los componentes de
un agente infeccioso o un anticuerpo inducido por dicho agente) y permite la posibilidad de formular
predicciones sobre el estado de los sujetos analizados. Las pruebas realizadas en individuos o en
poblaciones tienen varios propósitos, tales como ayudar a documentar laausencia de una
determinada enfermedad en un país o región, evitar su propagación a través del comercio,
erradicar una infección de una zona, confirmar el diagnóstico de los casos clínicos, estimar la
prevalencia de una infección para facilitar análisis de riesgo, identificar a los animales infectados
con vistas a desarrollar medidas de control, y clasificar los animales según su salud o estado deinmunización tras la vacunación. Es posible validar una única prueba para uno o varios propósitos
mejorando algunas características de su realización en cada caso (por ejemplo, elevando el nivel
de sensibilidad del diagnóstico – hasta el 99,99% – y disminuyendo a la vez su especificidad para
un ensayo general, o inversamente, estableciendo una alta especificidad asociada a un bajo nivel
desensibilidad en una prueba confirmativa).
Los principios de validación discutidos en este capítulo se centrarán sobre todo en los métodos de
detección de anticuerpos en sueros mediante, por ejemplo, la utilización del enzimoinmunoensayo
(ELISA). No obstante, estos mismos principios son aplicables a la validación de ensayos para otros
compuestos en sueros o tejidos. El capítulo 1.1.5 Validación ycontrol de calidad de los métodos de
la reacción en cadena de la polimerasa utilizados para el diagnóstico de las enfermedades
infecciosas extiende los principios aquí esbozados a un método directo de detección del agente
infeccioso: el ensayo de diagnóstico molecular.
Si consideramos las variables que pueden afectar a la realización de un ensayo, podremos
apreciar más claramente loscriterios que deben tenerse en cuenta para su validación. Estas
variables pueden agruparse en tres categorías: (a) la muestra – que refleja las interacciones
hospedador/organismo que influye en la composición y la concentración del componente a analizar
en la muestra de suero; (b) el sistema de ensayo – que incluye factores físicos, químicos,
biológicos y técnicos que afectan a la capacidad de laprueba para detectar en la muestra un
componente específico; y (c) el resultado de la prueba – es decir, la capacidad del sistema de
ensayo para predecir de forma precisa el estado del individuo o de la población en relación con el
componente en cuestión.
Los factores que influyen en la concentración y en la composición de un componente de la muestra
de suero dependen en gran medida delhospedador y son factores naturales (como la edad, sexo,
raza, estado nutritivo, embarazo, respuesta inmunológica), o bien factores adquiridos (como la
adquisición pasiva de anticuerpos, la inmunidad activa obtenida por la vacunación o la infección).
Otros factores que no dependen del hospedador, como la contaminación o el deterioro de la
muestra, también pueden afectar al componente a analizar endicha muestra.
Los factores que interfieren en la precisión analítica del sistema de ensayo incluyen la
instrumentación, el error técnico, la elección de los reactivos (tanto desde el punto de vista químico
como biológico), la calibración, ajuste y límites de validez de los controles, los recipientes de las

Manual de la OIE sobre animales terrestres 2008

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