Para Las Tares

Páginas: 5 (1004 palabras) Publicado: 11 de febrero de 2013
GLUCOSE -TR

Glucosa
Trinder. GOD-POD
Determinación cuantitativa de glucosa IVD
Conservar a 2-8ºC PRINCIPIO DEL MÉTODO La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico. El peróxido de hidrógeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor cromogénico de oxigeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD): β-D-Glucosa + O2 + H2O ⎯⎯⎯ → Ácido glucónico + H2O2⎯ H2O2 + Fenol + Ampirona ⎯⎯ ⎯ → Quinona + H2O ⎯ La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de 1,2 glucosa presente en la muestra ensayada . SIGNIFICADO CLÍNICO La glucosa es la mayor fuente de energía para las células del organismo; la insulina facilita la entrada de glucosa en las células. La diabetes mellitus es una enfermedad que cursa con una 1,5,6 hiperglucémia,causada por un déficit de insulina . El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio. REACTIVOS R1
Tampón
POD GOD

4. 5.

Mezclar e incubar 10 minutos a 37ºC ó 30 min a temperatura ambiente (15-25ºC). Leer la absorbancia (A) del Patrón y la muestra, frente al Blanco de reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos.

CÁLCULOS ( A )Muestra x 100 (Conc. Patrón) = mg/dL de glucosa en la muestra ( A ) Patrón Factor de conversión: mg/dL x 0,0555= mmol/L. CONTROL DE CALIDAD Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210). Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador. Cadalaboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles. VALORES DE REFERENCIA Suero o plasma: ≅ 3,33 – 6.10 mmol/L 60 – 110 mg/dL LCR: 60 – 80 % del valor en sangre
1

R2
Enzimas

GLUCOSE CAL

TRIS pH 7,4 92 mmol/L Fenol 0,3 mmol/L Glucosa oxidasa (GOD) 15000 U/L Peroxidasa (POD) 1000 U/L 4 - Aminofenazona (4-AF) 2,6 mmol/L Patrónprimario acuoso de Glucosa 100 mg/dL

Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
CARACTERISTICAS DEL METODO Rango de medida: Desde el límite de detección de 0,04 mg/dL hasta el límite de linealidad de 500 mg/dL. Si la concentración es superior al límite de linealidad, diluir la muestra 1/2 con ClNa 9 g/L y multiplicar elresultado final por 2. Precisión:

PREPARACIÓN Reactivo de trabajo (RT): Disolver ( → ) el contenido de un vial de R 2 Enzimas en un frasco de R 1 Tampón. Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. Estabilidad: 1 mes en nevera (2-8ºC) o 7 días a Temperatura ambiente (15-25ºC).
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en laetiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita la contaminación durante su uso. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. GLUCOSE CAL Una vez abierto, es estable 1 mes si se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. Indicadores de deterioro de los reactivos: - Presencia de partículas yturbidez. - Absorbancia (A) del Blanco a 505 nm ≥ 0,10. MATERIAL ADICIONAL - Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 505 nm. - Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. - Equipamiento habitual de laboratorio. MUESTRAS 1 Suero o plasma, libre de hemólisis y LCR. El suero debe separarse lo antes posible del coágulo. Estabilidad: La glucosa en suero o plasma es estable 3 días a 2-8ºC. PROCEDIMIENTO 1.Condiciones del ensayo: Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . 505 nm (490-550) Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz Temperatura. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC / 15-25ºC 2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada. 3. Pipetear en una cubeta: RT (mL) (Nota1,2) Patrón (µL) Muestra (µL) Blanco 1,0 --Patrón 1,0 10 -Muestra...
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