para los de microbiologia

Ing. Nuria Dávila Fernández y Dr. C. Juan Emilio Hernández García.*

Estos métodos rápidos presentan aspectos en común que los hacen
ser una herramienta importante en el trabajo del laboratorio para
determinación de microorganismos en leche.

L

os métodos rápidos de diagnóstico de microorganismos (M.O.)
patógenos y sus toxinas son
necesarios para la protección al consumidor, máxime sise tiene en cuenta que
los métodos convencionales requieren
generalmente de varios días y por otro
lado poseen menos sensibilidad, especificidad y selectividad. Técnicas como
el Inmunoensayo (June, 1992), la Hibridación de Ácidos Nucleicos (Curiale,
1990), Inmunodifusión (Flower y Klark,
1998) y la Conductividad Eléctrica,
son técnicas utilizadas para detectar
patógenos en alimentos talescomo
la Salmonella, Listeria y otros. En los
últimos años se han estado utilizando
métodos basados en la Inmunocaptura
magnética (Gooding y Chudary, 1997),
la reacción en cadena de la polimerasa
(PCR) por la amplificación material
genético, las pruebas con genes lux
(Reybroeck, 1996) y otras de tecnología
genética.

zada por aglutinación o formación de
grumos, desarrollo de colores apartir
de sustratos cromogéticos, formación
de una inmunobanda o fluorescencia.
El test de ELISA para detectar Salmonella y Listeria se desarrolló sobre los
años 80, este test emplea micro ELISA
acompañada de Ac monoclonales para
Salmonella o Listeria . En estudios
efectuados sobre las muestras contaminadas artificialmente con Salmonella,
para evaluar kit de ELISA con el métodoconvencional no se encontraron diferen-

Foto: Celsis

Seguridad Alimentaria

Métodos Rápidos para
Detectar Microorganismos
Patógenos.

cias significativas ni en su sensibilidad
ni especificidad. (June, 1992).

Aglutinación Latex
Este es el método más simple de los
Inmunoensayos desarrollados recientemente. El test usa partículas de Polietileno latex las cuales contactan con el
anticuerpo. Enpresencia de antígenos
en la muestra, la reacción se verifica
después de la incubación, si no existe
antígenos las partículas latex formarán
un sedimento (Reybroeck, 1996).

Inmunoensayos
La prueba de inmunoensayo se
basa en una interacción de antígenos
y anticuerpos que pueden ser visuali*Instituto de Investigaciones en Normalización, Ministerio
de Ciencia, Tecnología y Medio Ambiente.Sede Universitaria
de S. Spíritus.

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Foto: Toreuse

Mundo Lácteo y Cárnico

Septiembre/Octubre 2012

info@mundolacteoycarnico.com

Inmuno conteo magnético
Un nuevo enfoque para facilitar
la inmunocaptura de antígeno en
muestras de alimentos lo constituye
el Inmuno conteo magnético. En este
método, una muestra de alimento se
liga con un contador ferrometálico cubierto enplástico con los anticuerpos
(Ac) específicos para el M.O. patógeno,
después de un período de incubación
para que permita la inmunocaptura,
el material no unido al inmunoconteo
puede ser rápidamente eliminado mediante fuerza magnética. Dos test para
detectar Listeria han sido ensayados
y los mismos no requieren períodos
de preenriquecimiento, el método ha
sido capaz de detectar unaListeria en
muestras que contienen >1x104 ufc/
ml banales. La sensibilidad se mantuvo
por debajo de 104 para Listerias totales
y 0.6 ufc/g para la L.monocitogenes
(Jackson et al, 1992).

requiere ninguna manipulación manual
(Vasavada, 1993).

Hibridación de los Ácidos Nucleicos
La técnica de hibridación de Ácidos
Nucleicos (AN) puede ser empleada
para detectar M.O. patógenos de una
formarápida y exacta. El método
incluye una porción de una cadena
simple de AN que puedan ligarse a los
ADN o RNA específicos presentes en
los alimentos.

Foto: IKS International

Una prueba comercial para detectar
Salmonella fue introducida por Fitts
(1985), con este ensayo los resultados
son obtenidos en un periodo de 48
horas a diferencia del método convencional que requiere de 5 a 7...