Parametros sanguineos

PRÁCTICA 1. PARÁMETROS SANGUÍNEOS.

1.VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN.
La velocidad de sedimentación globular (habitualmente referida como VSG), es una prueba diagnóstica de laboratorio utilizada frecuentemente en veterinaria. Consiste en medir la velocidad con la que sedimentan (decantan, caen) los glóbulos rojos o eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra de plasma sanguíneo(Citratado o con EDTA) , en un periodo determinado de tiempo, habitualmente una hora
La velocidad de sedimentación es un parámetro interesante ya que variaciones mínimas de su valor nos indican estados infecciosos, procesos tumorales, hipotiroidismo, etc. Es característica de cada especie y depende de varios factores: viscosidad, tamaño del glóbulo, temperatura de la sangre, tipo de anticoagulanteutilizado, etc.

VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN EN SANGRE DE OVEJA Y CABALLO.

Usando una pipeta Wertergren y un portapipetas en su extremo o superior que nos permite aspirar sangre con anticoagulante se procede a enrasar la pipeta Westergren a cero.
Presionamos con el dedo la parte superior de la pipeta para que no se salga la sangre y se coloca en un soporte especial dejando la pipeta vertical paraquese produzca la sedimentación por efecto de la gravedad. Se toman valores de los milímetros alcanzados por el sedimento al cabo de una hora para calcular el Indice de Katz.

2. CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS PLÁSMICAS TOTALES

Para llevar a cabo esta practica vamos a utilizar el método de Biuret:
Se preparan 5 tubos con diferente concentración de albúmina bovina ( añadiendo diferentescantidades de la solución madre y completando si es necesario con agua para que todos los tubos tengan el mismo volumen).
Se pipetean 50 µl de todos los tubos anteriores y se añade a cada uno 2,5 ml de reactivo de Biuret (contiene Cu2*) haciendo un blanco con 50 µl de agua y 2,5 ml de reactivo de Biuret. Para hacer las muestras problemas se añaden 50 µl de plasma y 50 µl de suero en dos tubos diferentesy a cada tubo se le añaden 2,5 ml de agua.
MUESTRA | REACTIVO BIURET | MUESTRA | ABSORB 540nm |
BLANCO | 2,5 ml | 50 µl de agua | 0 |
1 | 2,5 ml | 50 µl madre | 0,526 |
2 | 2,5 ml | 50 µl patrón de 80 | 0,402 |
3 | 2,5 ml | 50 µl patrón de 60 | 0,328 |
4 | 2,5 ml | 50 µl patrón de 40 | 0,293 |
5 | 2,5 ml | 50 µl patrón de 20 | 0,133 |
Problema | 2,5 ml | 50 µl de plasma | 0,376 |Problema | 2,5 ml | 50 µl de suero | 0,246 |

Una vez que se han dejado reposar los tubos 20 minutos para que adquieran color (a mayor concentración de proteínas más color tendrán), se mide la absorvancia a 540 nm obteniendo los siguientes resultados:

Se calcula la ecuación de la recta cogiendo los puntos y, se representa la gráfica.
Y (mg/ml) | X ( Absorbancia) |
20 | 0,133 |
40 |0,231 |
60 | 0,328 |
80 | 0,425 |
100 | 0,523 |

3.VALOR HEMATÓCRITO
El valor hematocrito es el porcentaje en volumen ocupado por los eritrocitos de una muestra en sangre.
Determinación del valor hematocrito:
Se utiliza un capilar de microhematocrito que se introduce en la sangre que se encuentra en un tubo. El tubo de sangre se inclina y la sangre asciende porcapilaridad en el capilar de microhematrocrito. A continuación se limpia el capilar, y se pasa 2 ó 3 veces por un trozo de plastilina para taponar un extremo y evitar que se salga y por último se centrifuga el capilar 5 min a 10.000 r.p.m. Una vez centrifugado se coloca el capilar sobre una regla y se observa el porcentaje que ocupan los eritrocitos que han quedado sedimentados. En mi experimento elporcentaje de eritrocitos fue de: 36%.

4. CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA
La hemoglobina es una proteína de la sangre que se encuentra en el interior de los glóbulos rojos en condiciones normales. Un descenso de los valores de la hemoglobina es síntoma de anemia, leucemia, hemorragias, etc.
Cálculo de la cantidad de hemoglobina en la sangre:
Se mezclan 5ml de reactivo de Drabkin (contiene cianuro)...