Parasitologia

PRACTICA No. 7

“METODO DE CONCENTRACION POR SEDIMENTACION: TECNICA DE RITCHIE”

6.1.-Objetivo:
6.2.-Introducción:
Para aumentar la eficacia de la sedimentación por centrifugación para elaislamiento de la concentración de huevos helmintos de las heces. La característica singular de esta técnica es el empleo de la formalina para fijar y conservar la muestra fecal. Otras soluciones que seutilizan en combinación con el éter y se ha citado hasta el momento con el ácido acético, el mertiolato-yodo-formalina. Las soluciones de formalina y MIF con ventajosas cuando interesa conservar lamuestra.

6.3.-Material y Equipo:
a) Microscopio
b) Centrifuga
c) Gradilla
d) Portaobjeto
e) Cubreobjeto
f) Palillo
g) Tubo de ensaye
h) Tapón de hule

6.4.-Reactivos:
a) Formol al 10%
b)Lugol
c) Éter
d) Agua corriente

6.5.-Procedimiento:
1.-En el frasco con heces se vierten 20 ml de agua corriente, se mezcla hasta tener una suspensión que no este muy espesa ni muy diluida.2.-Se vierte la suspensión en un tubo de ensaye 2/3 partes evitando que pasen partículas grandes.
3.-Centrifugar por 3 minutos
4.-Eliminar el sobrenadante por decantación rápida, deberá de quedar entre1 y 1.5 ml de sedimento.
a) Poco sedimento: Agregarle de la suspensión original y se vuelve a centrifugar y decantar el sobrenadante.
b) Mucho sedimento: Agregar agua y mezclar parasuspender el sedimento, eliminar la mitad de la suspensión y agregar agua, mezclamos y centrifugamos y eliminamos el sobrenadante por decantación.
5.-Lavar el sedimento y agregarle agua, mezclar,centrifugar y eliminar el sobrenadante por decantación. Repetir el lavado cuantas veces sea necesario hasta que el sobrenadante quede claro.
6.-Después de eliminar el sobrenadante del último lavado yagregarle al sedimento 10 ml de formol al 10% (medio tubo), mezclar hasta suspender el sedimento y dejar en reposo durante 5 minutos.


7.-Agregarle éter de 2 a 3 ml y mezclar vigorosamente sujetando...