patogenicidad maracuya
Páginas: 9 (2050 palabras)
Publicado: 6 de noviembre de 2013
. DESARROLLO METODOLÓGICO
3.1. UBICACIÓN.
El presente trabajo de investigación se realizó en el laboratorio e invernadero del área de Fitopatología de la Estación Experimental Portoviejo del Instituto Nacional Autónomo de Investigaciones Agropecuarias (INIAP), ubicado en el sitio “El Cadi” de la parroquia Colón del cantón Portoviejo, Km 12 vía Portoviejo - Santa Ana, a 44 msnm, cuyascoordenadas son: 05° 57´44.2” de Latitud Sur y 98°92´14.4” de Longitud Oeste /. La investigación se desarrolló desde diciembre del 2011 hasta septiembre del 2012.
3.2. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN.
3.2.1 DETERMINACIÓN DEL AGENTE PATÓGENO CAUSAL DE LA MARCHITEZ EN MARACUYÁ (Passiflora edulis L.)
3.2.1.1 AISLAMIENTO DE PATÓGENOS.
Las muestras de plantas (variedad Mejorada 2009) consíntomas de la enfermedad fueron proporcionadas por el programa de Fruticultura de la Estación Experimental Portoviejo del INIAP, encargado de recorrer y colectarlas en las zonas húmedas del litoral ecuatoriano que están consideradas como las de mayor producción del maracuyá: Quinindé, en la provincia de Esmeraldas; parroquia San Isidro y el Valle del rio Portoviejo, en la provincia de Manabí; LaConcordia en la provincia de Santo Domingo de los Tsáchilas y Quevedo en la provincia de Los Ríos., completando 50 muestras aleatorias, 10 por cada zona recorrida; una vez en el laboratorio, las muestras se colocaron en medio agar – agua al 2%,
siguiendo una modificación del método propuesto por Agrios, G. (1990), que consiste en sumergirlas durante un minuto en una solución dehipoclorito de sodio al 2,5% y lavarlos después con agua destilada estéril, las muestras se ubicaron sobre papel filtro esterilizado para eliminar la humedad sequen y se procedió a realizar cortes más pequeños que se colocaron, con la ayuda de una pinza quirúrgica, en cajas de Petri que contenían agar – agua.
Las colonias de los hongos aislados que se obtuvieron, fueron transferidas a cajasde Petri con medio de cultivo papa – dextrosa – agar (PDA) al 2% para que se desarrollen y su posterior identificación.
3.2.1.2 IDENTIFICACIÓN DE HONGOS AISLADOS.
Para la identificación de los hongos se hicieron placas de los repiques de las cajas de Petri de las muestras sembradas (siete días después de la siembra), luego se observaron en el microscopio, y mediante característicasvisuales y morfométricas de las estructuras reproductivas se pudieron identificar los hongos aislados.
3.2.1.3 PRUEBAS DE PATOGENICIDAD.
La patogenicidad de los hongos aislados se la determinó mediante su inoculación en plantas de las variedades Mejorada INIAP 2009 y Criolla amarilla, para esto se utilizaron dos técnicas:
3.2.1.3.1 INOCULACIÓN CON GRANOS DE ARROZ.
Para multiplicar lospatógenos aislados se utilizó la técnica empleada por Arias et al (2006), que consiste en reproducir el hongo aislado en un sustrato de arroz usando fundas plásticas que sirvieron como cámaras húmedas para que desarrolle; la técnica de inoculación radica en colocar 5 granos de arroz con el patógeno en cada una de las plantas, se utilizaron 15 plantas de la variedad mejorada INIAP 2009 y 15 plantas dela variedad amarilla criolla, por cada prueba de patogenicidad, y 15 plantas por cada variedad que no se inocularon y que sirvieron como testigos. Las plantas fueron inoculadas a los tres meses después de la siembra.
TIPO DE EXPERIMENTO.
Esta investigación fue de tipo experimental bifactorial.
FACTOR EN ESTUDIO.
Variedad de maracuyá.
Agente patógeno.
NIVELES EN ESTUDIOVariedad de maracuyá:
1. Mejorada INIAP 2009
2. Criolla amarilla
Agente patógeno:
A. Macrophomina sp
B. Fusarium roseum
C. Fusarium oxysporum
COMBINACIÓN DE TRATAMIENTOS.
CÓD VARIEDAD AGENTE FITOPATÓGENO
T1 Mejorada INIAP Macrophomina sp
T2 Criolla Amarilla Macrophomina sp
T3 Mejorada INIAP Fusarium roseum
T4 Criolla Amarilla Fusarium roseum
T5 Mejorada INIAP Fusarium oxysporum
T6...
3.1. UBICACIÓN.
El presente trabajo de investigación se realizó en el laboratorio e invernadero del área de Fitopatología de la Estación Experimental Portoviejo del Instituto Nacional Autónomo de Investigaciones Agropecuarias (INIAP), ubicado en el sitio “El Cadi” de la parroquia Colón del cantón Portoviejo, Km 12 vía Portoviejo - Santa Ana, a 44 msnm, cuyascoordenadas son: 05° 57´44.2” de Latitud Sur y 98°92´14.4” de Longitud Oeste /. La investigación se desarrolló desde diciembre del 2011 hasta septiembre del 2012.
3.2. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN.
3.2.1 DETERMINACIÓN DEL AGENTE PATÓGENO CAUSAL DE LA MARCHITEZ EN MARACUYÁ (Passiflora edulis L.)
3.2.1.1 AISLAMIENTO DE PATÓGENOS.
Las muestras de plantas (variedad Mejorada 2009) consíntomas de la enfermedad fueron proporcionadas por el programa de Fruticultura de la Estación Experimental Portoviejo del INIAP, encargado de recorrer y colectarlas en las zonas húmedas del litoral ecuatoriano que están consideradas como las de mayor producción del maracuyá: Quinindé, en la provincia de Esmeraldas; parroquia San Isidro y el Valle del rio Portoviejo, en la provincia de Manabí; LaConcordia en la provincia de Santo Domingo de los Tsáchilas y Quevedo en la provincia de Los Ríos., completando 50 muestras aleatorias, 10 por cada zona recorrida; una vez en el laboratorio, las muestras se colocaron en medio agar – agua al 2%,
siguiendo una modificación del método propuesto por Agrios, G. (1990), que consiste en sumergirlas durante un minuto en una solución dehipoclorito de sodio al 2,5% y lavarlos después con agua destilada estéril, las muestras se ubicaron sobre papel filtro esterilizado para eliminar la humedad sequen y se procedió a realizar cortes más pequeños que se colocaron, con la ayuda de una pinza quirúrgica, en cajas de Petri que contenían agar – agua.
Las colonias de los hongos aislados que se obtuvieron, fueron transferidas a cajasde Petri con medio de cultivo papa – dextrosa – agar (PDA) al 2% para que se desarrollen y su posterior identificación.
3.2.1.2 IDENTIFICACIÓN DE HONGOS AISLADOS.
Para la identificación de los hongos se hicieron placas de los repiques de las cajas de Petri de las muestras sembradas (siete días después de la siembra), luego se observaron en el microscopio, y mediante característicasvisuales y morfométricas de las estructuras reproductivas se pudieron identificar los hongos aislados.
3.2.1.3 PRUEBAS DE PATOGENICIDAD.
La patogenicidad de los hongos aislados se la determinó mediante su inoculación en plantas de las variedades Mejorada INIAP 2009 y Criolla amarilla, para esto se utilizaron dos técnicas:
3.2.1.3.1 INOCULACIÓN CON GRANOS DE ARROZ.
Para multiplicar lospatógenos aislados se utilizó la técnica empleada por Arias et al (2006), que consiste en reproducir el hongo aislado en un sustrato de arroz usando fundas plásticas que sirvieron como cámaras húmedas para que desarrolle; la técnica de inoculación radica en colocar 5 granos de arroz con el patógeno en cada una de las plantas, se utilizaron 15 plantas de la variedad mejorada INIAP 2009 y 15 plantas dela variedad amarilla criolla, por cada prueba de patogenicidad, y 15 plantas por cada variedad que no se inocularon y que sirvieron como testigos. Las plantas fueron inoculadas a los tres meses después de la siembra.
TIPO DE EXPERIMENTO.
Esta investigación fue de tipo experimental bifactorial.
FACTOR EN ESTUDIO.
Variedad de maracuyá.
Agente patógeno.
NIVELES EN ESTUDIOVariedad de maracuyá:
1. Mejorada INIAP 2009
2. Criolla amarilla
Agente patógeno:
A. Macrophomina sp
B. Fusarium roseum
C. Fusarium oxysporum
COMBINACIÓN DE TRATAMIENTOS.
CÓD VARIEDAD AGENTE FITOPATÓGENO
T1 Mejorada INIAP Macrophomina sp
T2 Criolla Amarilla Macrophomina sp
T3 Mejorada INIAP Fusarium roseum
T4 Criolla Amarilla Fusarium roseum
T5 Mejorada INIAP Fusarium oxysporum
T6...
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