PCR 4
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA
Nombres: Francisca Chacón
María Paz Delgado
Andrea Huerta
Nicole Matteo
REACCIÓN EN CADENA DE
POLIMERASA
Técnica desarrollada en 1986 por Kary Mullis quepermite duplicar
un número ilimitado de veces de un fragmento de DNA.
Para realizar la duplicación se necesita:
- DNA
- tubo de ensayo
- reactivos
-Una cadena de nucleótidos
- fuentes de calor
para identificarlo se puede utilizar muestras de tejido, gotas de
sangre o semen
Se descubren organismos ya extinguidos, se puede construir árboles
filogenéticos, ampliar organismos yaextinguidos, identificación de
huellas genéticas y enfermedades contagiosas.
Inicialmente este proceso era lento ya que las polimerasas se
desnaturalizaban al realizar los cambios de temperatura.
Actualmente se utiliza un aparato llamado termociclador.
TERMOCICLADOR
¿Qué es?
Es un aparato de la biología molecular donde ocurren los ciclos de
temperatura de la reacción del PCR o método sanger.
Función:
Consiste en un bloque de resistencia eléctrica que distribuye la
temperatura homogénea normalmente a rangos de temperatura 4ºc a
96º c.
NUEVOS MÉTODOS DE
TERMOCICLADOR
Efecto Peltier:Jean Peltier (1834)
Creación de diferencias en la temperatura debido a un alto voltaje
eléctrico
Tubos del PCR( común mente llamado “eppendorf”)
Es un pequeño contenedor cilíndrico de plástico.
Termociclador en gradiente:
Método que se utiliza para seleccionar las condiciones térmicas
óptimas de una reacción de PCR.
CICLOS DE LA PCR
Desnaturalización: el gen de interés debedesnaturalizarse, pasa
de bicatenario a monocatenario y la temperatura esta elevada a 95ºc.
Hibridación: los CEBADORES comienzan a unirse con el
descenso de la temperatura.
Elongación: la polimerasasintetiza una nueva hebra de DNA , la
temperatura depende si se utiliza la TAQ POLIMERASA seria de
72ºc por 2 minutos.
HISTORIA
1971
1976
1986
1993
APLICACIONES DE LA PCR...
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