pcr anidada

Páginas: 3 (539 palabras) Publicado: 11 de mayo de 2014
FACULTAD DE RECURSOS NATURALES RENOVALES
UNIVERSIDAD ARTURO PRAT
INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA

PCR ANIDADA

INTRODUCCIÓN
• Un número de variaciones de PCR se han desarrollado

en los últimos20 años para tratar temas específicos de
investigación. Algunas de estas variaciones incluyen PCR
inversa, PCR in situ, PCR larga, PCR en tiempo real, y la
PCR anidada. Cuando existe el potencialde cebadores
que se unen a secuencias de ADN templado de otros,
en el área de destino (por ejemplo, cuando se utiliza
cebadores degenerados), PCR anidada puede aumentar
el rendimiento y laespecificidad de la amplificación del
ADN diana.

Fundamento de la Técnica
• Técnica muy sensible de PCR en la que el producto de una

amplificación es utilizado como molde para realizar una
segundaamplificación con cebadores que se ubican dentro de
la primera secuencia amplificada, es decir, cuando tenemos el
primer amplicón se pueden unir los cebadores y se hace de
nuevo una amplificacióndentro del amplicón inicial.

Metodología

• Como es evidente en la figura, los cebadores externos fueron

capaces de detectar el ADN viral a una dilución 10-5. En contraste, el
sistemacompleto de PCR anidada detectó el ADN viral a una dilución
10-8. Por lo tanto, el sistema de anidado es aproximadamente 1000
veces más sensible que el sistema con un único cebador.

Ventajas
• Reduceel efecto de agentes interferentes, resultando en un

incremento la cantidad de amplicon final
• Aumenta la sensibilidad en la detección al obtener un mayor número

de copias del fragmentoamplificado y disminuir la cantidad de ADN
molde.
• El control de la especificidad de la primera PCR, que se confirma

cuando la segunda amplificación es positiva, ya que los cebadores
de esta actúancomo sondas de identificación de la primera.
• La dilución de los productos de inhibición que puedan existir en la

muestra inicial.
• El uso de la PCR anidada puede eliminar con eficacia los...
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