PCR introducci n
Páginas: 2 (314 palabras)
Publicado: 6 de agosto de 2015
INTRODUCCIÓN
La reacción en cadena de polimerasa (PCR) es un método revolucionario desarrollado por Kary Mullis en la década de 1980. PCR se basa en el uso de la capacidad de la ADNpolimerasa para sintetizar nueva cadena de ADN complementaria a la cadena molde ofrecido. Debido a que la ADN polimerasa puede añadir un nucleótido solamente en un grupo 3'-OHpreexistentes, necesita una imprimación a la que se puede añadir el primer nucleótido. Este requisito hace que sea posible delinear una región específica de la secuencia de la plantilla que elinvestigador quiere amplificar.
Al final de la reacción de PCR, la secuencia específica se acumula en miles de millones de copias.
CONSULTA
1. Que son iniciadores degenerados
Estosen realidad son mezclas de partidores similares pero no idénticos. Pueden ser convenientes si se va a amplificar el mismo gen de organismos, puesto que los genes mismos pueden sersimilares pero no idénticos. El otro uso para los partidores degenerados es cuando el diseño de partidores se basa en la secuencia de proteínas. Como muchos codones diferentes pueden codificarun aminoácido suele ser difícil deducir qué codón se usa en un caso particular. Por ello la secuencia de partidores que corresponde al aminoácido isoleucina podría ser "ATH", por A deadenina, T de timina y H de adenina, timina o citocina, según el código genético de cada codón. El uso de partidores degenerados puede reducir ampliamente la especificidad de la amplificaciónpor PCR
2. Que cambios de parámetros de corrida del PCR se deben hacer a organismos que en su DNA sean ricos en G y C.
En el proceso de hibridación se somete el ADN a suficiente calorpara que la mitad de este se desnaturalice, en organismos ricos en G y C al ser mas estables estos enlaces, requieren que el ADN sea sometido a mayor temperatura y mayor tiempo.
La reacción en cadena de polimerasa (PCR) es un método revolucionario desarrollado por Kary Mullis en la década de 1980. PCR se basa en el uso de la capacidad de la ADNpolimerasa para sintetizar nueva cadena de ADN complementaria a la cadena molde ofrecido. Debido a que la ADN polimerasa puede añadir un nucleótido solamente en un grupo 3'-OHpreexistentes, necesita una imprimación a la que se puede añadir el primer nucleótido. Este requisito hace que sea posible delinear una región específica de la secuencia de la plantilla que elinvestigador quiere amplificar.
Al final de la reacción de PCR, la secuencia específica se acumula en miles de millones de copias.
CONSULTA
1. Que son iniciadores degenerados
Estosen realidad son mezclas de partidores similares pero no idénticos. Pueden ser convenientes si se va a amplificar el mismo gen de organismos, puesto que los genes mismos pueden sersimilares pero no idénticos. El otro uso para los partidores degenerados es cuando el diseño de partidores se basa en la secuencia de proteínas. Como muchos codones diferentes pueden codificarun aminoácido suele ser difícil deducir qué codón se usa en un caso particular. Por ello la secuencia de partidores que corresponde al aminoácido isoleucina podría ser "ATH", por A deadenina, T de timina y H de adenina, timina o citocina, según el código genético de cada codón. El uso de partidores degenerados puede reducir ampliamente la especificidad de la amplificaciónpor PCR
2. Que cambios de parámetros de corrida del PCR se deben hacer a organismos que en su DNA sean ricos en G y C.
En el proceso de hibridación se somete el ADN a suficiente calorpara que la mitad de este se desnaturalice, en organismos ricos en G y C al ser mas estables estos enlaces, requieren que el ADN sea sometido a mayor temperatura y mayor tiempo.
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.