pellet

Discusión:
En el laboratorio desarrollado, hemos puesto a prueba la centrifugación celular, y los métodos que esto conlleva. Para esto se ha utilizado pequeños trozos de hígado de vaca, los cuales son las muestras en estudio. Esta muestra debe pasar por una preparación para la centrifuga, esta ha sido descrito anteriormente en este informe.
Luego de llevarlo a la centrifuga obtenemos dosclaros estados los cuales corresponden a sobrenadante (S1) y pellet (P2). Esto debido a que la centrifugación separa los componentes celulares sobre la base de su tamaño y su densidad. Los componentes de mayor tamaño y de densidad más elevada experimentan la mayor fuerza de la centrifuga y se mueven con mayor rapidez, formando un precipitado en la base del tubo (Pellet 1) y los componentes máspequeños y menos densos se mantienen en suspensión (Sobrenadante 2) (Bray, 2002). Es en base a esto y la información proporcionada con anterioridad en las distintas actividades académicas es que podemos afirmar que en el P1 encontraremos moléculas que se pueden encontrar en el núcleo, esto debido a que presentan una mayor densidad y por ende un mayor coeficiente de sedimentación, dentro de las moléculasque encontramos en el pellet 1 está el DNA, proteínas que actúan en la transcripción y replicación, como las polimerasas, histonas, helicasas, factores, entre otras. Mientras que en el sobrenadante 1 se encuentran las partículas de menor densidad y por tanto un menor coeficiente de sedimentación como lo son: restos de mitocondrias, retículos endoplasmatico liso y rugoso, ribosomas, aparato de Golgientre otros orgánulos y moléculas que están en el citosol.
Luego de esto P1 y S1 fueron separados y S1 llevado nuevamente a la centrifuga, esta vez a una mayor velocidad. Como resultado de estos obtuvimos nuevamente un sobrenadante (S2) y un pellet (P2). Lo que se desarrolla aquí es una centrifugación diferencial q se basa en que las centrifugaciones repetidas a velocidades cada vez máselevadas fraccionaran los homogenizados celulares en sus componentes, es así como al identificar las moléculas que se encontraran en el S2 tenemos una fracción microsomal compuesto por los retículos liso y rugoso, y un P2 en el cual estarán las mitocondrias que serán las de mayor densidad.
En este laboratorio también se realizó la identificación de cristales de oxalato de calcio, en tejido muscular,esto debido a la abundancia de calcio en el retículo sarcoplasmico, en forma de ion, este ion es muy importante en la contracción de las fibras musculares. Se pudo observar la aparición de cristales por medio de un método cualitativo. Se utilizó el método de fraccionamiento celular para poder obtener un sobrenadante y un pellet.
Es así como una vez realizada la centrifugación y extraído elsobrenadante podemos afirmar que este presentara calcio, debido a que estructuras de baja densidad como lo es el retículo sarcoplasmico quedan en el sobrenadante, y la función principal de dicha estructura es concentrar y secuestrar iones de calcio (Lopez & Fernadez, 2003).Todas las reacciones que pueden y utilizan mayoritariamente el calcio ocurren a nivel del sarcoplasma, este es otro gran indicio de laobtención de calcio en esta muestra. Luego de la reacción necesaria para formar cristales de oxalato de calcio, descrita ya en el procedimiento, es que se puede observar estos bajo el microscopio. La presencia de estos nos ayuda a comprobar de manera cualitativa la presencia de este mineral y relacionarlo con su importancia en el proceso de contracción muscular.
En el siguiente laboratorio seutilizaron las muestras obtenidas anteriormente de pellet 1, pellet 2 y sobrenadante 2, estas corresponden a componentes nucleares, fracción mitocondrial, y microsomal respectivamente. En los procedimientos que se continúan se espera poder observar la presencia de proteínas pertenecientes a los productos de centrifugación.
Para la técnica de electroforesis se utilizó el gel de poliacrilamida...