Perfil lipidico

INFORME
DETERMINACIÓN DE PERFIL LIPÍDICO

Profesor (a):
Alumnos:

Profesor (a):
Alumnos:


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Introducción

Teniendo presente que el Colesterol es un precedente de hormonas esteroidales y ácidos biliares y que éstos, para transportarse por todo nuestro organismo por medio de lasangre, necesita ser parte de un complejo de lipoproteínas.
Estas lipoproteínas en una concepción básica se distinguen en su densidad y composición, de las cuales, las más denotadas son las LDL y HDL.
Las LDL, conocidas también por ser un colesterol malo, basado en que contribuye a la formación de placas ateroescleróticas en la zona del lumen de las arterias, provocando una disminución deldiámetro de estos vasos lo que nos lleva a un riesgo cardiovascular. Por otro lado, las HDL conocidas también por ser un colesterol bueno, poseen un efecto protector anti-ateroesclerótico.
Por consiguiente, en el siguiente laboratorio, determinaremos la concentración de colesterol y triglicéridos a partir de dos tipos de muestras, mediante la fórmula de Friedewald, la cual nos permite determinar lafracción LDL colesterol (LDLc) si conocemos el Colesterol Total (CT), la fracción HDL colesterol (HDLc) y los Triglicéridos (TG).

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Actividad

Materiales:
1. Espectrofotómetro 546nm
2. Cubetas de plástico de 1,5ml
3. Material Volumétrico (micro pipetas de 100ul y 1000ul y tubos de ensayos)
4. Muestra de Suero (normal y patológico)5. Timer o Cronometro
6. Reactivo (para uso en colesterol y triglicéridos)

Método de Trabajo:
1. Se trabaja en grupo

2. Se determina 2 fases de la actividad:

* Determinación de Colesterol Total

* Se seleccionan 4 tubos de ensayos (TB, TE, TSN y TSP), a los cuales se le agregan, por medio de micro pipetas: 10uL de H2O, 10uL de Estándar Colesterol, 10uL de SueroNormal y Suero Patológico. Respectivamente.
* Se le agrega con la micro pipeta 1000uL de Reactivo específico para medir Colesterol a los cuatro tubos de ensayo.
* Se agitan cada uno de los tubos de ensayos, con el objetivo de mezclar sus sustancias contenidas
* Se incuba cada tubo a 20-25°C durante 15 min. Se logra esa incubación gracias al roce de tipo cizalla de los tubos con las zonaspalmares de las manos de los alumnos.
* Se vierte, por medio de micro pipetas 1000uL de cada tubo a las cubetas de plásticos (hay una cubeta para cada tubo de ensayo)
* Se prosigue llevando las cubetas de plásticos al espectrofotómetro configurado a una absorbancia de 546nm con anterioridad.
* Los datos resultantes del espectrofotómetro estarán a disposición de ser calculados bajo lasiguiente fórmula:

* TODOS EL PROCESO ESTARÁ DISPUESTO A LA SIGUIENTE TABLA:

Colesterol | Tubo Blanco (TB) | Tubo Estándar(TE) | Tubo Suero Normal (TSN) | Tubo Suero Patológico (TSP) |
H2O | 10uL | - | - | - |
Estándar Colesterol (200mg/dl) | - | 10uL | - | - |
Suero Normal | - | - | 10uL | - |
Suero Patológico | - | - | - | 10uL |
Reactivo | 1mL | 1mL | 1mL | 1mL |

*Determinación de Triglicéridos

* Se seleccionan 4 tubos de ensayos (TB, TE, TSN y TSP), a los cuales se le agregan, por medio de micro pipetas: 10uL de H2O, 10uL de Estándar Colesterol, 10uL de Suero Normal y Suero Patológico. Respectivamente.
* Se le agrega con la micro pipeta 1000uL de Reactivo específico para medir Triglicéridos a los cuatro tubos de ensayo.
* Se agitan cada uno delos tubos de ensayos, con el objetivo de mezclar sus sustancias contenidas
* Se incuba cada tubo a 20-25°C durante 10 min. Se logra esa incubación gracias al roce de tipo cizalla de los tubos con las zonas palmares de las manos de los alumnos.
* Se vierte, por medio de micro pipetas 1000uL de cada tubo a las cubetas de plásticos (hay una cubeta para cada tubo de ensayo)
* Se...