Perfusion Cardiaca

ALUMNO: Pocholo

MATERIA: HISTOLOGIA ANIMAL.

EQUIPO: 2

GRUPO: BE63

PROFESOR: DR. ARMANDO FERREIRA NUÑO.

PRACTICA: #3 PERFUSION CARDIACA.


TRIMESTRE: 11I

PRACTICA N° 3. PERFUSIÓN CARDIACA.

INTRODUCCIÓN.
a) Describa brevemente la técnica de perfusión tisular para la fijación de tejidos.
En este procedimiento la solución fijadora se introduce a través del sistemacirculatorio mediante el cual accede a todas las células del tejido gracias a la red de capilares. Mediante este método se puede fijar un animal completo introduciendo la solución fijadora a través del ventrículo cardiaco, con lo que el fijador llegará a todas las células irrigadas por la sangre bombeada por dicho ventrículo (circuito pulmonar o corporal). También podemos fijar un único órgano en elcaso de que podamos aislar e introducir la solución fijadora en la arteria principal que irriga dicho órgano. Este método es mucho más efectivo que el de inmersión, ya que la solución fijadora llega a escasa distancia de todas las células de la estructura perfundida. Por tanto, la velocidad de penetración del fijador no es una condición limitante. El volumen de fijador necesario también es menorpuesto que la solución fijadora se va renovando constantemente y por tanto no se diluye con el medio acuoso del tejido y no pierde potencial fijador.
Antes de introducir el fijador en el sistema de vasos sanguíneos hay eliminar previamente la sangre con una solución de lavado oxigenada, de otra manera su interacción con el fijador produce trombos que impedirían la fijación de determinadas zonas delanimal o del órgano. Respecto a las precauciones mencionadas anteriormente en el método de inmersión debemos cuidar aquí también la osmolaridad, el pH y el tiempo de fijación.
b) Describa en qué casos se recomienda emplear esta técnica de fijación.
La perfusión no siempre es posible llevarla a cabo, como es el caso de biopsias o tejidos vegetales.
c) Cuál es su importancia en histología.Para evitar los cambios post-mortem y así poder conservar de la mejor manera posible las estructuras celulares del tejido para su análisis histológico posterior.

MATERIAL.
Enliste todos los materiales, animales y reactivos que se emplearon para realizar esta técnica.
* Formol amortiguado.
* Frascos alcoholes de 70° 80° 96° 100°
* Xilol.
* Microscopio óptico.
* Estuche dedisección.
* Charola de disección.
* Cámara de anestesia.
* Algodón.
* Vaso de precipitado de 100ml.
* Éter.
* Gasas.
* Rata.
* Bomba de perfusión.

MÉTODOS.
Describa la técnica de perfusión de tejidos tal y como se realizó en el laboratorio con la rata.
* Iniciamos la práctica anestesiando a la rata con un algodón empapado con éter, una vez anestesiada lapasamos a la charola de disección y procedimos a realizar la incisión, una vez realizada la incisión colocamos ganchos en los extremos para poder abrir la caja torácica del animal, posteriormente el profesor expuso el corazón y lo sujeto con las pinzas de disección para cortar la carótida, inmediatamente comenzó a salir un chisguete de sangre, inserto la aguja que está conectada a la manguera de labomba de perfusión en el ventrículo izquierdo el cual está conectado a la arteria aorta, esto con el objetivo de introducir el fijador en todos los tejidos del animal, una vez que el fijador comenzó a penetrar los tejidos, pudimos observar movimientos bruscos en el animal lo cual nos indicaba que el fijador estaba entrando correctamente, se dejó caer el chorro de agua sobre las vísceras del animalpara quitar los restos de sangre que habían quedado; pasando unos minutos observamos el cambio de coloración en algunas partes de la rata, específicamente en las patas, cola y por último en los ojos, lo que nos indicaba que la perfusión se había realizado con éxito. Una vez terminado este proceso el profesor se dispuso a realizar cortes de diversos tejidos como: ovario, grasa, útero, intestino,...