peroxidasa

PURIFICACIÓN DE PEROXIDASAS VEGETALES: ALGUNAS CARACTERÍSTICAS
ESTRUCTURALES Y ESPECIFICIDAD POR SUSTRATOS NATURALES
Miguel Ángel Duarte-Vázquez; Blanca García, Carlos Regalado, Arturo Rojo*. DIPA,PROPAC. Facultad de
Química, Universidad Autónoma de Querétaro. C. U. Cerro de las Campanas, S/N, CP 76010. Fax (4) 2156867.
*UAM-Iztapalapa. Dpto de Biofisicoquímica. Av. Michoacán y la Purísima.México, 09340, DF.
madv@sunserver.uaq.mx; carlosr@sunserver.uaq.mx
Palabras clave: Peroxidasas vegetales, características estructurales, especificidad.
Introducción. La peroxidasa es una enzimaampliamente
distribuida en la naturaleza cuya función principal es oxidar
donadores de hidrógeno. Su función fisiológica no se conoce
en su totalidad, principalmente por la presencia de múltiplesisoformas. Además, se han encontrado notorias diferencias en
las propiedades catalíticas y fisicoquímicas entre peroxidasas
de diferentes fuentes vegetales. Para asignarle una función
biológica yobtener información estructural es indispensable
aislar una isoforma en particular y estudiarla.
El objetivo de este trabajo fue aislar las isoformas de
peroxidasas más importantes en nabo y brócolipara obtener
información a cerca de su peso molecular (PM), contenido de
carbohidratos, porcentaje de estructura secundaria y
especificidad por diferentes sustratos naturales; información
básicaindispensable para aclarar la relación entre estructura y
función de este enzima.
Metodología. Las peroxidasa soluble de nabo se purificó
según (1). La peroxidasa de nabo unida a membrana fueextraída con CaCl2 0.2 M y purificada usando cromatografía
de intercambio aniónico e hidrofóbica. La peroxidasa de
brócoli se purificó según (2). La especificidad de la enzima
por los sustratos sedeterminó siguiendo (3). Los espectros de
dicroismo circular se obtuvieron en un espectropolarímetro
Jasco J-715 y el contenido de estructura secundaria se
determinó usando el software K2D (4). El...