Ph Bioquimica

INTRODUCCION
La escala de pH fue ideada por el bioquímico danés S. P. L. Sorensen como medio de evitar números engorrosos tales como 0.0000001 ó 1.0 x 10-7 para expresar las bajas concentraciones de ion hidrogeno de los fluidos biológicos. Definió el termino pH como:
pH= log101[H+]= -log10[H+]
El valor de 7.0 para el pH de una disolución exactamente neutra no es, por tanto, una cifra escogidade manera arbitraria; deriva del valor absoluto del producto iónico del agua a 25°C. Resulta muy importante observar que la escala de pH es logarítmica. Decir que dos disoluciones difieren en su pH en una unidad significa que una disolución posee una concentración de iones hidrogeno diez veces superior a la de la otra.
El pH de una solución acuosa se define como el logaritmo negativo de laconcentración molar de hidrogeniones (H3O+). La determinación del pH es uno de los procedimientos analíticos más importantes y más utilizados en bioquímica, ya que el pH determina muchas características notables de la estructura y la actividad de las macromoléculas biológicas y, por tanto, de la conducta de las células y de los organismos. El patrón primario para la medida de las concentración es delion hidrogeno (y por tanto del pH) es el electrodo de hidrogeno. Es éste un electrodo de platino tratado especialmente y que se sumerge en la disolución cuyo pH se va medir. La disolución se halla en equilibrio con el hidrogeno gaseoso a una presión y una temperatura conocidas. La manera mas exacta de determinar el pH es usando un electrodo de vidrio. Este electrodo depende del intercambio deiones en las capas hidratadas formadas sobre la superficie del electrodo de vidrio compuesto de aproximadamente 22% de Na2O, 6% de CaO y 72% de SiO2.
El electrodo de vidrio debe mantenerse en agua destilada o en solución de KCl saturada para evitar el crecimiento de microorganismos. En el electrodo de vidrio está presente un electrodo de referencia interno de plata/cloruro de plata (Ag/AgCl) rodeadopor un electrolito de HCl 0.1M. Este electrodo de referencia interno produce un potencial estacionario.
El electrodo de vidrio actúa como una batería cuyo voltaje depende la actividad del H+ de la solución en que está sumergida.
En el pH metro, el electrodo de vidrio y el electrodo de referencia de calomel, están diseñados para que a pH 7 dé un potencial cero. Antes de medirse el pH de unasolución desconocida el pH metro se estandariza con soluciones amortiguadoras de pH conocidos. El voltaje depende de la temperatura, por lo que los potenciómetros tienen un control de ajuste para la temperatura de la solución.
Una solución amortiguadora o de tampón son aquéllas que ante la adición de un ácido o base son capaces de reaccionar oponiendo la parte de componente básica o ácida paramantener fijo el pH. 
OBJETIVO
Se aprenderá el uso correcto del pH metro y se preparan soluciones con diferentes valores.
HIPOTESIS
Si se aprende a utilizar de manera correcta el pH metro entonces se podrá determinar de manera precisa el pH de alguna sustancia.
Si se aprende a preparar una solución buffer se lograra realizar una buena calibración.
MATERIAL
* Pipetas Pasteur
*Potenciómetro
* Probetas de 200mL
* Vaso de precipitados de 250mL
* Piseta con agua
* Agitador magnético
* Espátula
* Muestras para determinar pH: leche, jugo, etcétera.

REACTIVOS
* KCl saturado
* Solución estándar pH 4, pH 7 y pH 10
* Solución de ácido bórico 0.1 M
* Solución de NaOH 10M
* HCl concentrado
* Ácido acético
* Acetato de sodio
* EDTA* KH2PO4
* K2HPO4.
METODO
Uso del pH metro y medición del pH
1) El electrodo del pH metro siempre debe estar sumergido en una solución de KCl o agua destilada. Enjuagar el electrodo con agua destilada y secar.
2) Ajustar el pH metro primero a pH 7, después a 4 y finalmente a 10 con soluciones reguladoras comerciales.
3) Entre cada pH enjuagar con agua destilada (Fig.2B)....