Phina records

MATERIALES

1. Buffer
2. Primer f
3. Primer r
4. DNTP S
5. Mg Cl2
6. M2O
7. TAG POLIMERAZA
8. AGUA
9. Pipetas
10. Termociclador
11. Cámara deelectroforesis gel de agaroza
12. Cámara de radiación UB

RESUMEN

PCR POLIMERASA ( CHAIN REACTION )
Un amplificador del ADN se utiliza para la enzima de un microorganismo con el fin debuscar en un gen un fragmento.
La técnica fue utilizada por el Dr: kary mullís en 1987 en el cual por medio de una reacción se miraba un fragmento de hemoglobina con un ´PCR termociclador el cualsube y baja temperaturas los pasos de desnaturalización a 95grados en donde las cadenas se separan
Los cebadores primer previamente diseñados reacciona con la hebra sencilla del DNA y se pegan enlugares específicos por complementariedad de bases para esta, se basa la temperatura y el tiempo puede variar entre cebadores según sea el caso.
Polimeracion o extensión una polimerasa de DNAextiende los primers en el espacio comprendido entre ambos primer y coloca cleotidos trifosfatados DNTP S amortiguador 50 MKCL 10Mm tris ( pit8) a temperatura ambiente.
Desnaturalización 95 gradoscelsios cadenas se separan 15 segundos
Apareamiento ( aneling )
Praing exones nucleótidos las lineas son los primer s especificos
las dos cadenas de ADN.



Procedimiento

agua115,2
buffer 45
MgCl2 18,1
DNTPs 13,1
primer 6,75
mini centrifugado para nivelar la muestra
para cada tubo 23 muetras
25-2 de ADN para completar 25
Tapar los tubos

Reacciónde ADN
Volver a centrifugar
Pasar al termosciclador el cual sube y baja la temperatura
Tocch down 45,7 por gramo
SE PREPARA EL GEN AL 1% SE SIEMBRA
PASA ALA CAMARA A 110 VOLTIOSBROMO TE ETIDIO EN 2 CADENAS





| 1x | X5 |
Buffer | 5M | 25 |
PRIMER F | 0,75 ML | 3,75M |
PRIMER R | 075 ML | 3,75M |
DNTP s | 2,0ML | 10M |
Mg Cl2 | 2,0...