Phylogenetic And Morphological Identificacion Of Colletotrichum Boninense

Phylogenetic and morphological identification of Colletotrichum boninense: a novel causal agent of anthracnose in avocado.

En la última década, la enfermedad fúngica conocida como antracnosis ha limitado severamente la producción comercial de aguacate en Michoacán, México, estado líder en produccion. Pérdidas de producción debido a la antracnosis aumentan cada año. Esta enfermedad seidentifica por los sitomas como pudrición de fruto color marrón-negro en la pericarpio (Willingham et al., 2000) y la pudrición blanda en la mesocarpo. Estos pueden afectar a la fruta entera en el tiempo en que las condiciones son favorables para los agentes patógenos (Kobiler et al., 1993).
Hasta hace poco, un hongo responsable de estos brotes, Colletotrichum gloeosporioides [teleomorfo: Glomerellacingulata], sepensaba era el único agente causal de la antracnosis en el aguacate que crece en otras regiones (Willingham et al, 2000;. Hartill & Everett, 2002). Sin embargo, en 2007, Colletotrichum acutatum [Teleomorfo: Glomerella acutata] fue reportado por primera vez como un agente causal en México (Avila-Quezada et al., 2007). Esta especie ha sido previamente citado como una causa depudrición de frutos de aguacate en Australia (Simmonds, 1965), Israel (Pruskyet al., 1982), Brasil (Peres et al., 2002) y Nueva Zelanda (Hartill & Everett, 2002). Estas dos especies de hongos son sabe que se producen en una amplia gama de especies de plantas, géneros, y las familias cultivadas en todo el mundo (Sutton, 1992; Freeman et al, 2000;. Lubbe et al, 2004)..
Debido a la crecienteimportancia de la antracnosis en las principales zonas productoras de aguacate de México, CgInt y CaInt2 especies de primers específicos que diferencian entre aislamientos de C. gloeosporioides y C. acutatum , respectivamente (Brown et al., 1996), utilizados para evaluar el Colletotrichum en la población de Michoacán . Sin embargo, estos cebadores amplifican sólo las especies anteriormente mencionadas , yalgunos aislamientos no amplificado utilizando estos cebadores, o fueron sólo débilmente amplificada, y su identidad sigue siendo poco clara. Por lo tanto, el espaciador interno transcrito (ITS) y la subunidad grande rDNA nuclear (nLSU) han sido amplificada con fines de identificación filogenéticos. Además, criterios morfológicos se han tenido en consideración para establecer las posicionestaxonomcas correctas de las especies que causan la antracnosis de aguacate cv. Hass en las principal zonas productoras de aguacate en México.
Materiales y métodos
Los aislados fúngicos
De 2004 a 2007, frutos de aguacate cv. Hass de diferente tamaños (diámetro en el intervalo de 0,8-8 cm) y que muestran diferentes grados de sintomas de la antracnosis se recogieron para identificar los patógenosimplicados en esta enfermedad. Los síntomas típicos eran pequeñas manchas rojizas o 'spots' pimienta en la fruta inmadura cerca a mayor tamaño, color marrón-negro en el pericarpio (Willingham et al, 2000;. Avila-Quezada et al, 2009) y la pudrición blanda.el mesocarpio (Kobiler et al, 1993;.. Avila-Quezada et al,2009). Los frutos fueron obtenidos de nueve municipios de importancia para la producciónde aguacate en Michoacán que han reportado incidencias significativas de antracnosis.
Las muestras de Colletotrichum spp. fueron aisladas dentro de 18-24 h de la cosecha de frutas con síntomas. Para los análisis morfológicos y moleculares, una muestra poblacional de 31 aislamientos fue creado. Estos aislados fueron derivados por escisión de una pequeña pieza de pericarpio necrotico con márgenes detejido sano. Los frutos tuvieron previamente desinfección de hipoclorito de sodio al 1% para 3 min y se enjuagaron tres veces con agua destilada estéril.
Las muestras de tejido se colocaron en placas de Petri que contenían patata dextrosa agar (PDA) (Difco) y se incubaron a temperatura ambiente (25_C). Después de 7 días,cultivos monoconidiales se inocularon en agar agua medio (WA).
Todos los...