Picnometria

Resumen
La finalidad de esta práctica fue lograr la separación del DNA a partir de un vegetal (brócoli), por medio del método de electroforesis.
Las proteínas tienen la propiedad de ser anfotéricas; es decir, son aquellas moléculas que poseen un extremo hidrofílico, o sea, que es soluble en agua, y otro hidrófobo, o sea que rechaza el agua.
La electroforesis es un método empleado para separarde proteínas por medio de su tipo de carga; basado en su punto isoeléctrico, haciendo migrar las proteínas a través de un campo electromagnético regulado por el voltaje del equipo.
Se combinan con los iones hidrógeno y con otros iones presentes en la disolución, dando lugar a la carga neta de la molécula. A la concentración de iones hidrógeno, o al pH, para el cual la concentración del ionhíbrido de una proteína es máxima y el movimiento neto de las moléculas de soluto en un campo eléctrico es prácticamente nulo se denomina punto isoeléctrico.
No se pudieron obtener los resultados deseados ya que no sé mostró en la cámara de correr de electroforesis ningún tipo de movimiento hacia el polo positivo,( que era al que se esperaba el sentido del movimiento); Debido a que la muestra debrócoli era un poco vieja, lo que interfirió en la elaboración de la practica para poderse llevar a cabo correctamente.
Introducción
El gran número de proteínas que existen, su gran variedad de actividades biológicas y las diferencias químicas existentes entre las proteínas homólogas de los distintos organismos determinan que la extracción, la purificación y la caracterización de las proteínasconstituyan un punto central en toda investigación bioquímica.
Los métodos iniciales de aislamiento de las proteínas fueron empíricos, lentos y muy laboriosos; sin embargo, con los nuevos métodos asequibles en la actualidad. No existe un procedimiento único, o un conjunto de procedimientos mediante los cuales todas y cada una las proteínas puedan aislarse, sino que normalmente se sigue una secuencia deetapas de separación para cualquiera proteína, que dará por resultado un grado de purificación elevado y un alto rendimiento.
También es necesario un procedimiento para liberar las proteínas en forma soluble de la célula intacta o de la estructura de tejido sin provocar pérdidas de actividad. Normalmente se emplea la trituración mecánica u homogenización de los tejidos vegetales para romper lapared celular y liberar los contenidos celulares, los cuales pueden ser valorados después para determinar su contenido en la proteína deseada. A veces la pared celular puede ser debilitada o lisada por tratamientos con ciertas enzimas. Si la proteína deseada se halla por casualidad asociada a una membrana o un orgánulo membranoso, debe ser extraída de allí en forma soluble, lo cual puede conseguirse,frecuentemente, por simple extracción con agua o bien por una ruptura mecánica o sónica de las membranas, y también mediante el empleo de detergentes para lograr la desintegración de la estructura membranosa
La separación de proteínas sobre la base de su carga eléctrica dependen en último término de sus propiedades ácido-básicas, las cuales se hayan determinadas en gran medida por el numero y eltipo de grupo R ionizables de sus cadenas polipeptídicas. Puesto que las proteínas difieren en composición aminoácido y secuencia, cada proteína posee propiedades ácido-básicas características. Los principios implicados en la separación electroforética de las proteínas son mejor comprendidos si en primer lugar se consideran la curva de valoración ácido-básica de una proteína globular de contenidoaminoácido conocido.
Hay varias formas diferentes de electroforesis, también llamada ionoforesis, útiles para el análisis y la separación de proteínas. El prototipo de todos los métodos modernos es la electroforesis libre o de frente móvil, desarrollada en primer lugar por A. Tiselius, en Suecia, en los años 1930. Las proteínas por tanto emigran mucho más lentamente en un campo eléctrico que...