Plasmidos

PLÁSMIDOS
Son moléculas de ADN circular de doble hélice, se encuentran en las bacterias y corresponden al llamado minicromosoma. Son capaces de autoreplicarse porque poseen un origen de replicaciónpropio y pueden pasar a otras bacterias por medio de conjugación. Ambos procesos se realizan independientes del cromosoma principal, cromosoma principal y plásmidos se encuentran en el nucleoide.Puede ser utilizado como vector de clonamiento si cumple los sgtes requisitos:
1. Poseer un origen de replicación eficiente, es decir, ser capaz de generan en condiciones normales entre 15 a 20copias de sí mismo como mín. por bacteria
2. Poseer un marcador de selección, por ejemplo, un gen que codifique proteínas que den resistencia a antibióticos para luego poder reconocer aquellasbacterias que incorporaron el plásmido y las que no lo hicieron.
3. Poseer una caja de clonamiento, esto es una pequeña región donde hay varias secuencias palindrómicas donde pueden actuar las enzimas derestricción.
LAS ENZIMAS DE RESTRICCIÓN:
Son enzimas bacterianas descubiertas por Smith que pueden reconocer determinadas secuencias de bases de ADN (entre 4 a 8 pares de bases), generalmentepalindrómicas (Las secuencias palindrómicas en el ADN son idénticas al leerlas en el mismo sentido EJ: 5’3’) y de cortarla en ambas cadenas en lugares específicos.
Pueden cortar de dos formas ala doble cadena:
1. En el mismo lugar, generando extremos romos como ocurre cuando se usa la enzima HpaI
2. En nucleótidos distintos de las cadenas complementarias como en el caso de laEcoRI e Hind III que generan extremos cohesivos.
Las enzimas de restricción se pueden emplear para cortar ADN de especies diferentes y luego unir los fragmentos para obtener ADN recombinante,
* Encél. Eucariotas las proteínas están unidas a otras moléculas como los glúcidos. Estas proteínas son modificadas después de ser sintetizadas no pueden ser producidas por las bacterias, y en este caso,...