PNO Determinaci N De Contenido De Vitamina C Por HPLC En Liposomas

Páginas: 3 (734 palabras) Publicado: 6 de abril de 2015
Determinación de contenido de Vitamina C por HPLC en liposomas
Introducción:
De acuerdo con el desarrollo del método analítico y la curva de calibración se determino que el rango de detección delAscorbato de sodio por esta técnica es de 1-0.1mg/mL. La longitud de onda es de 245 nm. Es necesario prender el HPLC por lo menos 30 min previo al análisis. Las diluciones son diferentes y muyimportante que se sigan al pie de la letra.
Preparación de la muestra al 40%
Tomar 1 mL de la solución de liposomas-Vit C al 40% (400mg/mL), añadirlo a un matraz volumétrico y aforarlo a 100 mL con aguadestilada (factor de dilución de 100). Esta solución final tendrá una concentración de 4mg/mL.
Filtrar la solución de 4mg/mL a través de un filtro de 0.22m
Tomar 10 mL de la solución de 4mg/mL filtrada,añadirla a un matraz volumétrico y aforarlo a 100 mL con metanol grado HPLC (factor de dilución de 10), agitar por 3 minutos y colocar en el refrigerador por una hora. El metanol es crítico en este pasopara hidrolizar los liposomas y extraer la vitamina C. Esta solución final es la solución de trabajo y tiene una concentración de aproximadamente 0.4mg/mL.
Preparación de la muestra al 20%
Tomar 1 mLde la solución de liposomas-Vit C al 20% (200mg/mL), añadirlo a un matraz volumétrico y aforarlo a 100 mL con agua destilada (factor de dilución de 100). Esta solución final tendrá una concentraciónde 2mg/mL.
Filtrar la solución a través de un filtro de 0.22m
Tomar 1 mL de la solución de 2mg/mL filtrada y diluirla en un tubo de ensayo con 3 mL de metanol grado HPLC para hacer una dilución finalde 1:4 (factor de dilución de 4), agitar por 3 minutos y colocar en el refrigerador por una hora. El metanol es crítico en este paso para hidrolizar los liposomas y extraer la vitamina C. Estasolución final es la solución de trabajo y tiene una concentración de aproximadamente 0.5mg/mL.
Preparación de la muestra al 10%
Tomar 1 mL de la solución de liposomas-Vit C al 10% (100mg/mL), añadirlo a...
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