PODER DE RESOLUCI N
Una separación cromatográfica se optimiza variando las condiciones experimentales hasta que los componentes de una mezcla se separen completamente en un tiempo mínimo. Los experimentosde optimización intentan reducir el ensanchamiento de zonas o alterar las velocidades de migración relativas de los componentes.
El poder de resolución de una columna cromatografica es su capacidadpara separar dos o más sustratos o para distinguir entre ellos. Depende de dos factores: primero la separación entre dos picos y segundo, la definición de las bandas. Algunos investigadores expresan elpoder de resolución como:
Esta definición es arbitraria y puede que no posea un significado exacto, porque la desviación tipo σ será diferente para las dos bandas y se tendrá que emplear un valormedio. Pero al revisarlo experimentalmente se pondrá de manifiesto que si de una columna salen dos sustratos, uno tras otro, con volúmenes de elución separados por lo menos en 4σ, los dos picosaparecerán separados entre sí, con un valle pronunciado entre ambos. Si la separación entre los volúmenes de elución es menor que 2σ, será difícil que se tengan dos picos, pues el grafico de laconcentración total es función del volumen presentara un solo máximo.
La separación de dos compuestos depende de la distancia entre el centro de los picos o manchas correspondientes a cada uno de ellos y de laaltura de los mismos, por tanto: una resolución adecuada supone una resolución adecuada.
La resolución R, de una columna proporciona una medida cuantitativa de su capacidad para separar dosanalitos. La resolución de una columna se define como:
Figura 1 (Skoog D., et al 1997)
FORMAS DE MEJORAR UNA RESOLUCIÓN
La resolución de una fase estacionaria dada se puede mejorar alargandola columna, y de este modo aumentando el numero de platos. Sin embargo, una consecuencia adversa de aumentar el numero de platos es un aumento en el tiempo requerido para la resolución
Para separar...
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