Post 5


Universidad Autónoma de San Luis Potosí


Facultad de ingeniería
Ingeniería Agroindustrial

Laboratorio Químico-Biólogo L27
Práctica no. 5
“Observación de bacterias”




M.I Guerrero Nava Silvia
Roldán Flores Fernanda Vianey



6 de octubre de 2015


Objetivo
Observación y clasificación general de bacterias, manejando la tinción diferencial de Gram.

Introducción
En esta quinta práctica delaboratorio el maestro biólogo Luis Manuel Rosales Colunga nos apoyó proporcionándonos dos tipos de bacterias para observarlas por medio de la Tinción de Gram o tinción diferencial de Gram, la cual es una técnica de laboratorio que se utiliza rutinariamente en los estudios microbiológicos de las bacterias. Fue diseñada por Christian Gram, un científico danés, en el año 1884. El objetivo de Gram eraconseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de bacterias para así poder estudiarlas y clasificarlas. La prueba resultó todo un éxito y pronto se convirtió en una técnica muy útil no solo para el estudio de las bacterias, sino también para poder identificarlas rápidamente en una infección y seleccionar el antibiótico más adecuado para tratarla.
Para que podamos sabercuáles bacterias son Gram positivas o Gram negativas estas se teñirán de un color entre azul o morado si son positivas y de rojo o rosado si son negativas. Prácticamente todas las bacterias pueden ser clasificadas como Gram positivas o Gram negativas.
Relacionando estas bacterias con nuestra carrera de ingeniería agroindustrial estas tendrían una gran importancia pues participan en los procesos dela agroindustria, tanto alimentarios como no alimentarios principalmente como fermentadores.












Material y equipo
Microscopio compuesto
Material contaminado, cultivo bacteriano
Porta objetos y cubre objetos
Asa bacteriológica
Colorantes
Alcohol o acetona
Metodología
1. Esterilizar el asa.
2. Una vez que se halla esterilizado bien el asa agregar un gota de agua en las cuatro portaobjetos.
3. Tomar los dos cultivos bacterianos y con ayuda del asa tomar dos pequeñas muestras de cada uno y colocarlos en cada uno de los porta objetos.
4. Mesclar el agua con la pequeña parte del cultivo que colocamos en los porta objetos hasta formar una película delgada.
5. Ya que hallan mezclado bien se tendrán que adherir pasándolo cerca de mechero. Se sabrá que están adheridas cuando sesequen.
Ya que se cumplan estos pasos se le agregara los tres tipos de colorantes (cristal violeta, lugol y safranina) a las bacterias que pusimos en los porta objetos.
1. Agregar unas cuantas gotas de cristal violeta a la bacteria de manera que la cubra totalmente. Esperar un minuto.
2. Transcurrido el tiempo lavarlo hasta que no salga más colorante teniendo cuidado de que no salpique a alguna parte denuestro cuerpo.
3. Secar el exceso de agua con papel secante
4. Ahora se cubrirá con la solución de lugol hasta que se cubra toda la mancha. Esperar de 1 a 2 minutos.
5. Lavar hasta que no salga más lugol y quitar el exceso de agua.
6. Decolorar las muestras con alcohol al 95%. Le tiene que estar cayendo alcohol por lo menos 30 segundos, una vez terminado limpiar el exceso.
7. Aplicar safraninahasta que la mancha este totalmente cubierta. Esperar un minuto.
8. Lavar con agua y secar con papel.
9. Observar en el microscopio.





Guía de estudios
1. Dibuje las observaciones que realizo.
















2. De acuerdo a su forma ¿Qué clase de bacterias observó?
Bacillus subtilis y Escherichiacoli
3. Haga un esquema de la pared celular de una bacteria Gram positiva y una negativa.


4. Si nose utiliza el colorante de contraste (safranina o fucsina) durante la tinción de Gram ¿de qué color se verían las bacterias Gram positivas? ¿y las negativas?
Tanto las bacterias Gram positivas como las Gram negativas permanecerán teñidas de color violeta
5. ¿Cuál es la utilidad de la tinción de Gram?
La tinción de Gram es una técnica de laboratorio que permite identificar distintos tipos de...