Potencial Hidrico FMP Alumnos

Prácticas de Fisiología Molecular de Plantas

Grado de Bioquímica

DETERMINACIÓN DEL POTENCIAL HÍDRICO DE UN TEJIDO VEGETAL

1. Fundamento
El potencial hídrico de un tejido vegetal determina la dirección y la intensidad del movimiento del
agua en relación con el entorno en el que se encuentra el tejido. Un tejido vegetal sumergido en una
solución de menor potencial hídrico (ψ

sol

más negativoque el del tejido) perderá agua y por tanto

peso. Por el contrario, si la solución externa tiene un potencial hídrico mayor (ψ

sol

menos negativo

que el del tejido) dicho tejido ganará agua y peso. Aquella solución en la que el tejido ni gane ni
pierda peso tendrá el mismo potencial hídrico que el de las células del tejido. El potencial hídrico
de un tejido puede determinarse, por lo tanto,mediante un método gravimétrico que evalúe la
variación del peso de muestras de tejido sumergidas en soluciones de diferente potencial hídrico.
Otro método para determinar el potencial hídrico de un tejido es el desarrollado por el investigador
ruso Chardakov (método densitométrico). Este método se basa en detectar las variaciones de la
densidad de soluciones de diferente potencial hídrico donde sesumerge una muestra de tejido. La
densidad de la solución varía como consecuencia del intercambio de agua con el tejido vegetal. Si
el tejido cede agua a la solución (ψ

sol

más negativo que el del tejido), ésta se diluye y disminuye su

densidad. Si el tejido toma agua de la solución (ψ

sol

menos negativo que el del tejido), ésta se

concentra y aumenta su densidad. Aquella solución cuyadensidad no varíe tendrá el mismo
potencial hídrico que el de las células del tejido.
La variación en la densidad de cada solución se determina de forma cualitativa. Para ello,
observaremos el comportamiento de una gota de solución control tras ser depositada en el seno de
la solución que contuvo el tejido vegetal (solución problema). La solución control es la solución
original antes de la inmersión deltejido que, además, se colorea con una cantidad despreciable de
azul de metileno para favorecer el seguimiento visual. Al depositar una gota de la solución control
(azul) en el seno de la solución problema (incolora) ésta tiende a flotar si la densidad de la solución
problema ha aumentado o a hundirse si ha disminuido. Si la densidad no ha variado, la gota
permanece inmóvil entre dos aguas.

12. Materiales y soluciones empleadas
Reunir los siguientes materiales:
1 jarrita aforada de 250 ml, 1 agitador magnético y un vaso de precipitados
1 frasco de agua destilada y 1 bandeja de pesada
1 gradilla de plástico y 8 tubos de plástico de 50 ml con tapón de rosca azul
1 gradilla metálica y 16 tubos de ensayo (cristal)
1 pipeta de 10 ml, 1 pipeta de 5 ml, 1 pipeta Pasteur con tetina y unapropipeta
1 aguja enmangada, 1 bisturí
1 tubérculo de patata y 1 taladrador
1 rotulador y 1 hoja de papel de aluminio
1 tira de papel de parafina para sellar tubos

3. Técnica
3.1. Preparación de soluciones con diferente potencial hídrico
El potencial hídrico de una solución a presión atmosférica depende directamente de la
concentración de solutos. Soluciones de sacarosa, a distinta concentración,tienen potenciales
hídricos que son menores cuanto mayor sea la concentración de sacarosa.

En primer lugar, calcule y pese la cantidad de sacarosa necesaria para preparar 100 ml de una
solución de sacarosa 1M (peso molecular de la sacarosa: 342,30 g/mol). Emplee la jarrita aforada y
el agitador magnético para preparar esta solución.

A continuación, a partir de la solución de sacarosa 1 M prepare,por dilución, soluciones de 20 ml
de las siguientes concentraciones de sacarosa: 0,05 M; 0,15 M; 0,20 M; 0,25 M; 0,30 M; 0,35
M; 0,45 M y 0,55 M y guárdelas en los tubos de 50 ml con tapón azul, debidamente etiquetados.
Prepare las soluciones ordenadamente, añada primero, con la pipeta, a cada tubo, el volumen de
agua destilada requerido y luego el de sacarosa 1M. Cierre los tubos y mezcle...