POTENCIALES EMERGENTES DE TRANSPOSONES PARA TERAPIA GENICA Y GENERACION DE CELULAS MADRES PLURIPOTENTES INDUCIDAS

POTENCIALES EMERGENTES DE TRANSPOSONES PARA TERAPIA GENICA Y GENERACION DE CELULAS MADRES PLURIPOTENTES INDUCIDAS

Introducción

Pruebas convincentes continúan emergiendo de los ensayos clínicos sobre el gen
La terapia es eficaz para tratar a pacientes con una amplia gama de enfermedades,
dando lugar a efectos terapéuticos a largo plazo. En particular, en los niños
con trastornoshereditarios de otro modo letal como consecuencia de la sífilis congénita o
deficiencias inmunológicas, los beneficios clínicos a largo plazo se han obtenido
después de la terapia de genes, y estos niños son esencialmente normales principales
vidas. A pesar de estos éxitos, la terapia génica también ha enfrentado una serie de
contratiempos, y ha habido preocupaciones sobre la seguridad dealgunos genes
enfoques de la entrega. A pesar de múltiples factores parecen determinar el
el éxito de la terapia génica, los mecanismos principales limitantes identificadas hoy
son mutagénesis de inserción mediante la integración de vectores virales, inadecuado
expresión del transgén en los tipos de células no deseadas o condiciones, y
activación inmune contra el vector viral, las célulasde ingeniería genética, o
el producto transgénico. Las consecuencias de estos eventos van desde
el fracaso para establecer la expresión del transgen estable o eliminación de las
gen-células modificadas a la activación de la toxicidad aguda sistémica, porque
de las reacciones inmunes e incluso transformar el crecimiento celular y la oncogénesis.
 Algunos de estos efectos secundarios soninherentes al tipo de vectores virales
utilizados. Por otra parte, la producción de vectores virales para los ensayos clínicos se ha
plagado de obstáculos técnicos y reglamentarios. Por lo tanto, hay una necesidad de
desarrollar alternativas seguras y eficientes basadas ​​en vectores no virales, que
son menos inmunogénicas de vectores virales. Desafortunadamente, la mayoría no viralesvectores no son capaces de conseguir una alta expresión y estable de la
gen terapéutico. Sin embargo, el uso de la entrega de genes no virales enfoques
en relación con la tecnología de última generación transposón puede
ahora potencialmente superar algunas de estas limitaciones, que es el foco
de esta revisión.

Los transposones de transferencia de genes

Los transposones son elementosdiscretos de ADN que tienen el distintivo
capacidad de moverse de un lugar a otro cromosoma. Los transposones se dividen en dos categorías principales: (1) retrotransposones que se someten a la transposición
a través de un ARN intermedio y (2) transposones de ADN que se mueven
directamente el ADN. La transposición de esta última clase incluye un conservador
mecanismo de "cortar y pegar, en laque el transposón se extirpa
del donante lugar y posteriormente se integra en otro
de localización de las proteínas transposasa. Este proceso tiene una función clave que
transposones ADN hace especialmente atractivo como herramientas de la entrega del gene.
Es decir, la transposasa puede actuar en trans en prácticamente cualquier secuencia de ADN
que está flanqueado por las secuenciasterminales repetidas, que normalmente se encuentran en cada final del transposón. En consecuencia, a su vez transposones de ADN en un
herramienta gen de entrega, un sistema binario se ha desarrollado (Figura 1)
integrado por (1) un plásmido de expresión que codifica para la transposasa y
(2) de un donante plásmido que contiene el ADN que ha integrado, que es
flanqueado en cis por la repetición desecuencias transposón terminales necesarios para
transposición. La transposasa une estas secuencias repetidas terminales y
cataliza la escisión del gen de interés del donante como del plásmido
así como su inserción en el genoma de la célula huésped. Físicamente
separar el gen de la transposasa del transposón que contiene los donantes
plásmido, es posible optimizar la estequiometria de ambos...